完全性基因敲除（Knockout，KO）小鼠，也叫全身性基因敲除小鼠，是通過基因敲除技術，把需要敲除目的基因的所有外顯子或幾個重要的外顯子或者功能區域敲除掉，獲得全身所有的組織和細胞中都不表達該基因的小鼠模型。
TurboKnockout®完全性基因敲除小鼠
TurboKnockout®完全性基因敲除小鼠是通過TurboKnockout®技術把需要敲除目的基因的所有外顯子或幾個重要的外顯子或功能區域敲除掉，使得全身所有的組織和細胞中都不表達該基因。建立在傳統基因打靶技術之上的TurboKnockout®基因編輯技術不僅具有傳統ES打靶技術成熟、修飾準確、效果穩定等優點，更是使得傳統ES打靶技術減少兩代繁育時間，周期快至4個月，是大片段基因修飾等復雜模型的常用構建方式。
TurboKnockout®完全性基因敲除小鼠的建系原則與流程：
1. 去除抗性基因Neo：選擇陽性TurboKnockout®小鼠與野⽣型小鼠雜交，自刪除Neo，獲得去除打靶載體中的Neo基因的F1代雜合子KO（+/-）小鼠。
2. 再挑選⼀對F1代雜合子KO小鼠（+/-）進行自交，通過PCR鑒定篩選得到基因敲除的F2純合子KO小鼠（-/-）。
CRISPR-Pro完全性基因敲除小鼠
CRISPR-Pro完全性基因敲除小鼠主要采用靶基因設計和構建gRNA與Cas表達質粒，造成目的基因的功能區域被敲除，獲得全身所有的組織和細胞中都不表達該基因的小鼠模型。CRISPR-Pro技術沿用核酸酶介導的基因修飾技術體系，采用獨特的受精卵處理方式使受精卵偏好同源重組修復路徑，進而提高同源重組效率，制作周期快至3個月。
CRISPR-Pro完全性基因敲除小鼠的建系原則與流程：
1. 通過針對一個或多個靶基因或靶基因不同位點設計、構建相應的gRNA質粒，體外轉錄為RNA后，與Cas蛋白和mRNA⼀起原核顯微注射獲得測序鑒定陽性的F0代陽性小鼠。
2. F0代陽性小鼠與野⽣型小鼠進行交配，獲得PCR和測序鑒定陽性的F1代雜合子小鼠。
3. 選擇來自同⼀只F0代小鼠，基因型⼀致的F1代雜合小鼠，達到性成熟后互配，可獲得F2代小鼠。對獲得的F2代小鼠進行PCR及測序鑒定，理論上，F2代小鼠中25%為純合子，50%為雜合子，25%為野生小鼠。
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