基因敲入(Knockin)是在目的基因特定位點引進特定的突變或外源基因,比如在目的基因引入特定點突變,或將報告基因(如EGFP、Luciferase等)或需要表達的功能性基因。
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基因敲入(Knock-in)模型的應用:
基因敲入模型包括:
通過CRISPR基因編輯技術,構建一個基因敲入小鼠模型一般需要6-9個月。
通過ES細胞打靶技術,構建一個基因敲入小鼠模型一般需要9-12個月。
您可以聯系我們的技術顧問,為您設計并定制您的基因敲入小鼠模型。
常規基因敲入
外源基因共表達策略:
外源基因替代小鼠內源基因表達策略(即敲入同時敲除):
條件性點突變
將點突變(人類致病候選點突變)與Cre-LoxP系統結合,引入到小鼠同源基因對應位置,可實現組織特異性點突變。
通過插入Loxp位點和含有突變位點的Exon實驗基因的條件性點突變。
人源化
將小鼠內源基因替換為人源同源基因,構建用于疾病、免疫、生理學研究以及抗體藥物篩選及藥效評價的人源化基因工程小鼠模型。
完整替換策略:
直接插入人源cDNA策略: