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諾賽為客戶提供高通量、快速優(yōu)質(zhì)的EST測序服務(wù),同時(shí)還建立了成熟的cDNA文庫構(gòu)建平臺,可進(jìn)行多種cDNA文庫構(gòu)建,為EST研究提供全方位服務(wù)。
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服務(wù)商: 北京諾賽基因組研究中心有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
諾賽為客戶提供高通量、快速優(yōu)質(zhì)的EST測序服務(wù),同時(shí)還建立了成熟的cDNA文庫構(gòu)建平臺,可進(jìn)行多種cDNA文庫構(gòu)建,為EST研究提供全方位服務(wù)。
特點(diǎn):
Ø 我們擁有成熟的實(shí)驗(yàn)方法和豐富的文庫建庫經(jīng)驗(yàn),在cDNA合成、酶切、連接及轉(zhuǎn)化等方面擁有成熟的技術(shù)和文庫構(gòu)建經(jīng)驗(yàn)豐富的專業(yè)人員,建成的文庫全長cDNA比例高,可用于大規(guī)模基因測序和目的基因的篩選。
Ø 構(gòu)建的為質(zhì)粒文庫,可選擇的載體有pCMV.SPORT6(真核表達(dá)載體)和pSPORT 1原核表達(dá)載體
服務(wù)流程:
Ø 階段1:反轉(zhuǎn)錄酶催化合成cDNA第一鏈
Ø 階段2:cDNA第二鏈的合成
Ø 階段3:cDNA的甲基化
Ø 階段4:接頭或銜接子的連接
Ø 階段5:凝膠過濾法分離cDNA
Ø 階段6:cDNA與載體臂的連接
客戶提供:
Ø 請?zhí)峁┍M量多的新鮮材料:
a.如果實(shí)驗(yàn)材料為動物組織材料,樣品量需大于5g
b.如果實(shí)驗(yàn)材料為植物組織材料,樣品量需大于20g
c.如果實(shí)驗(yàn)材料為各種培養(yǎng)細(xì)胞,請?zhí)峁?×10^7以上培養(yǎng)好的細(xì)胞。
Ø 客戶也可以直接提供Total RNA,但要保證沒有降解,需要溫育后(37℃,1-2小時(shí))通過電泳等方法進(jìn)行判斷,其純度要求A260/280≥1.8,樣品總量大于250μg。
提交結(jié)果:
Ø 實(shí)驗(yàn)完成后,我們將提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,構(gòu)建好的cDNA文庫庫容量為106。
Ø 在連接克隆cDNA片段時(shí),進(jìn)行了cDNA片段的長度篩選,基本上去除了400bp以下的cDNA小片段,保證了較長cDNA片段的克隆效率,克隆載體一般為pcDNA3.1,也可以為客戶提供的其它載體。
Ø 我們可以對構(gòu)建好的文庫提供后續(xù)如克隆保菌、PCR擴(kuò)增、大量測序等服務(wù),需另行收費(fèi)。
提供服務(wù):
Ø cDNA文庫構(gòu)建,大規(guī)模測序,數(shù)據(jù)信息處理及分析