簡介

  免疫印跡immunoblotting又稱蛋白質印跡western blot，它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。Western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。Western blot常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。 
  仁源生物為您提供標準western blot技術服務（自備一抗或由仁源生物代購）。并對band進行灰度分析，得出蛋白表達相對定量結果。

原理

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋 白水平的表達。

送樣要求

需新鮮或正確保存的蛋白樣品或者蛋白粗提液
陽性對照樣品（如果有）
檢測目的蛋白的一抗（或仁源生物代購）
組織樣品不少于50mg
細胞不少于5×106個
總蛋白濃度不低于 2μg/μl（至少50μl）

服務流程

蛋白提取和定量（如果提供蛋白樣品，則直接電泳預實驗檢測抗體特異性）
SDS-PAGE 10-15% 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
轉膜（PVDF膜）
封閉 （5%脫脂奶粉）
一抗孵育（其中內參基因為Gapdh或Actin）
二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成實驗無法繼續，則收取相關預實驗費用）
顯色（ECL）
曝光、洗片、灰度分析

提供結果

蛋白濃度
膠片
膜
灰度分析（如果需要）
實驗報告

結果實例

仁源生物技術（上海）有限公司（HumangenBiotechInc）是一家專門從事疾病動物模型制備研發的高科技生物醫藥技術企業。公司由多名留學美國的生物學與醫學博士創建，擁有多項專利技術，在疾病動物模型制備方面具備豐富的經驗。公司目前建有成熟的基于遺傳操作的小鼠與斑馬魚模型制備技術平臺，竭誠為廣大從事生命科學與醫學研究的用戶提供疾病動物模型制備的技術服務。

我們同時具有多種國際先進水平的基因打靶（基因敲除與基因敲入）技術，包括經典的胚胎干細胞同源重組技術、TALEN技術、CRISPR-Cas9技術、染色體工程技術以及轉座酶技術，配備小鼠、斑馬魚和細胞三類技術平臺，可根據用戶需求選擇最適合的技術路線和平臺。

仁源生物以最專業化的技術水平、最周到的服務理念、最佳的服務效率，向科研院校、醫院用戶、生物技術公司和藥物開發企業，提供疾病動物模型構建和上下游相關實驗的技術服務和技術合作。