實驗原理
慢病毒屬于逆轉錄病毒科。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 來源的一種病毒載體,包含了包裝、表達、穩定整合所需要的遺傳信息。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質粒、細胞系的輔助下,經過病毒包裝成為有感染力的病毒顆粒,通過感染細胞或活體組織,實現外源基因在細胞或活體組織中表達。 目前比較廣泛采用的第三代包裝系統——四質粒系統,只含有HIV-1共9個基因中的3個,即gag、pol、rev。由于HIV-1基因組成分中60 %被去除,因此父代病毒無法復制,是目前重組系數最低的一個慢病毒包裝系統 。 采用四質粒系統,即目的基因表達達載體和三個包裝質粒, pMDLg/pRRE、pVSV-G和pRSV-Rev,在293-T細胞株中可包裝出慢病毒顆粒。
實驗流程
實驗結果
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