服務簡介

       Cas9蛋白的CDS長達4kb，克隆難度和包毒難度都相對大，將Cas9基因高效導入細胞是應用Cas9/CRISPR系統(tǒng)進行基因敲除的難點之一，極大地限制可供選擇的將基因導入細胞的方法。并且在用CRISPR/Cas9系統(tǒng)進行基因敲除時，還需要同時轉入識別靶點的gRNA，篩選陽性細胞的抗性基因或熒光基因，用同源重組法進行基因敲除，還需要導入同源重組模板。如此多的基因共同表達，很難得到較高的基因編輯效率，造成后續(xù)的陽性克隆篩選和檢測工作難度大。

       漢恒生物獨創(chuàng)性研發(fā)出慢病毒Cas9表達體系，該體系采用慢病毒體系先在細胞中穩(wěn)定表達Cas9蛋白，構建穩(wěn)定表達Cas9蛋白的細胞系，再在該細胞系的基礎上導入gRNA和基因敲除實驗中用到的其它原件用于特異性基因敲除。

產(chǎn)品優(yōu)勢

a、實驗方案設計更靈活。由于不必表達大蛋白Cas9，可以根據(jù)細胞特性選擇化學轉染、腺病毒、腺相關病毒等多種方法導入或敲除相關基因；

b、提高基因敲除效率。在穩(wěn)定表達Cas9蛋白的細胞系上進行基因敲除比瞬時轉染Cas9進行基因敲除的效率更高；

c、可對同一細胞進行多個基因敲除實驗。對于需要在同一個細胞系中進行多個基因的編輯或需要長期用一個細胞模型進行多項基因研究，先構建一個Cas9蛋白穩(wěn)定表達的細胞系可顯著提高后續(xù)實驗的效率，降低實驗難度。

服務特點

a、適用于在同一個細胞系中需要進行多個基因敲除的實驗；

b、基因敲除效率比直接質粒轉染更高；

c、提供多種不同熒光和抗性標記的慢病毒表達載體，更易篩選到基因敲除成功細胞；

d、接受cas9蛋白穩(wěn)定表達不同細胞系定制。

服務流程

A、cas9載體構建及慢病毒包裝

     將cas9基因CDS區(qū)克隆至慢病毒載體，并進行cas9慢病毒包裝。

B、穩(wěn)定株篩選

     將cas9慢病毒感染特定的目的細胞，進行cas9穩(wěn)定表達的細胞株篩選。

漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]是一家專門從事生物技術服務和產(chǎn)品銷售與研發(fā)的高科技企業(yè)，公司專注于為廣大科研工作者提供腺病毒、慢病毒、逆轉錄病毒包裝、細胞穩(wěn)定株篩選、siRNA設計和microRNA研究服務。漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]自成立之日起，就以“為客戶提供最優(yōu)質的服務和品質卓越的產(chǎn)品”為宗旨，憑借國際先進的實驗設備和經(jīng)驗豐富的實驗技術人員，獲得了中國頂級病毒包裝供應商的美譽，是全國唯一一家可以提供病毒現(xiàn)貨的公司。漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]提供的產(chǎn)品和服務具有產(chǎn)品質量好、滴度高、服務優(yōu)及周期短等特點。