產品簡介

研究某個基因的功能最常用的手段是在宿主細胞中過量表達或者通過RNA干擾的方法knock-down該基因，常規手段有瞬時轉染和篩選穩定細胞系。

篩選出該基因的過表達或者RNA干擾的穩定細胞系會給您的實驗帶來極大的便利。有了穩定細胞系，后期的Co-IP或者Pull-Down實驗會非常便利；穩定表達重組熒光蛋白的細胞系可以讓您動態的觀察分子在細胞中的運動。 構建穩定細胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標志進行篩選。最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選，篩選得到可穩定表達目的蛋白，或者穩定表達沉默特定基因的細胞株。

篩選穩定細胞系的方法

1）轉染質粒后，單克隆方法篩選穩定細胞系；

2）慢病毒感染篩選穩定細胞系。

慢病毒感染方法較質粒轉染篩選單克隆方法更方便和高效，是目前主流的穩定細胞系篩選方法。慢病毒幾乎可以感染所有種類的細胞，并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組，進行長時間的穩定表達，因此，慢病毒常用于制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株。

漢恒生物構建包裝的帶puromycin抗性的慢病毒，在感染目的細胞后，可通過加入puromycin進行選擇性篩選，從而獲得穩定表達shRNA或者特定基因的細胞株。我們提供病毒包裝服務（您可以自己完成穩態細胞篩選），或者一站式的穩定細胞系的篩選服務。

服務流程

1、客戶提供宿主細胞，并明確告知基因號或者基因序列；

2、表達載體或者干擾載體構建；

3、包裝慢病毒；

4、慢病毒感染，篩選穩定細胞系。

漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]是一家專門從事生物技術服務和產品銷售與研發的高科技企業，公司專注于為廣大科研工作者提供腺病毒、慢病毒、逆轉錄病毒包裝、細胞穩定株篩選、siRNA設計和microRNA研究服務。漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]自成立之日起，就以“為客戶提供最優質的服務和品質卓越的產品”為宗旨，憑借國際先進的實驗設備和經驗豐富的實驗技術人員，獲得了中國頂級病毒包裝供應商的美譽，是全國唯一一家可以提供病毒現貨的公司。漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]提供的產品和服務具有產品質量好、滴度高、服務優及周期短等特點。