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腺相關病毒AAV包裝
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腺相關病毒AAV包裝
產品簡介
腺相關病毒（Adeno-Associated Viral Vector，AAV）屬于微小病毒科( parvovirus)，為無包膜的單鏈線狀 DNA 病毒。AAV 的基因組約 4700bp，包括上下游兩個開放讀碼框架(ORF)，位于分別由 145 個核苷酸組成的 2 個反向末端重復序列(ITR)之間。 由于腺相關病毒具有宿主范圍廣、安全性高、免疫原性低、表達穩定和物理性質穩定等優點，已被廣泛地應用于基礎研究和臨床試驗中，并且腺相關病毒載體已成為世界上最常用的基因治療載體之一。
圖 1. AAV 基因組結構
AAV病毒特點
1. 安全性高：迄今從未發現野生型 AAV 對人體致病，重組 AAV 基因組序列上去除了大部分的野生型 AAV 基因組元件，進一步保證了安全性；
2. 免疫原性低：AAV2 的基因組僅 4681 個核苷酸，便于用常規的重組 DNA技術進行操作，而且進行動物實驗時造成的免疫反應小；
3. 宿主范圍廣：能感染分裂細胞和非分裂細胞；
4. 表達穩定：能介導基因的長期穩定表達；
5. 物理性質穩定：在 60℃不能被滅活，能抗氯仿；
AAV生物學特性
表1 不同病毒的生物學特性比較
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慢病毒 |
逆轉錄病毒 |
腺相關病毒 |
腺病毒 |
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包膜 |
有 |
有 |
無 |
無 |
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顆粒直徑 |
90-100 nm |
90-100 nm |
20-30 nm |
60-90nm |
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基因組 |
dsRNA |
dsRNA |
ssDNA |
dsDNA |
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表達起始時間 |
48-72h |
48-72h |
72-96h |
24-48h |
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表達持續時間 |
> 2 months |
> 2 months |
> 6 months |
~1 month |
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宿主基因組整合方式 |
隨機高頻整合 |
隨機高頻整合 |
定向低頻整合或非整合 |
非整合 |
AAV載體不同血清型
研究發現 AAV 具有多種血清型，各種不同血清型的 AAV 載體的主要區別是衣殼蛋白不同，因此對不同的組織和細胞的轉染效率存在差異。目前漢恒生物在包裝腺相關病毒時有 12種不同的 AAV 血清型可供客戶選擇，建議客戶針對不同組織器官選擇相應血清型的 AAV 病毒，見表 2。
表2. 12種不同血清型AAV對各組織器官細胞的親和性
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血清型 |
組織親和性 |
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AAV1 |
肌肉，心臟，骨骼肌（包括心肌），神經組織 |
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AAV2 |
中樞神經，肌肉，肝臟，腦組織，眼， |
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AAV3 |
肌肉，肝臟，肺，眼 |
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AAV4 |
中樞神經，肌肉，眼，腦 |
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AAV5 |
肺，眼，中樞神經，關節滑膜，胰腺 |
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AAV6 |
肺，心臟 |
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AAV7 |
肌肉，肝臟 |
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AAV8 |
肝臟，眼，中樞神經，肌肉 |
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AAV9 |
心臟，肌肉，肺（肺泡），肝臟，中樞神經 |
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DJ |
肝臟，視網膜，肺，腎臟 |
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DJ/8 |
肝臟，眼，中樞神經，肌肉 |
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Rh10 |
肺, 心臟，肌肉，中樞神經，肝臟 |
服務流程
AAV應用介紹
A. AAV9感染小鼠腦組織（PMID: 23503602）
B. AAV2感染大鼠腦組織
C. AAV2感染腎臟（PMID: 23216315）
D. AAV感染心臟（PMID: 20703310）
E. AAV9感染骨骼肌（PMID: 21811247）
F. AAV感染肝臟（PMID: 19861950）
AAV其他相關特色服務
1. AAV在體自噬流檢測服務
2. 在體敲除AAV-SaCas9包裝服務
3. AAV光遺傳技術服務
