流式檢測及分選
簡介
流式細胞術(Flow Cytometry, FCM)是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,與傳統的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優點,成為當代最先進的細胞定量分析技術。
流式細胞分選原理
當經熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動室內。流動室內充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動下,細胞被排成單列,以一定速度從流動室噴口噴出。在流動室的噴口上配有一個超高頻的壓電晶體,充電后振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷,當液滴流經過帶有幾千伏的偏轉板時,在高壓電場的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,沒有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實現細胞的分離。
流式細胞分選技術是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它可根據發射光的熒光強度和波長將發光顆粒亞群分開并可實現單克隆分選。