一、免疫共沉淀（Co-IP）概述

        免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是利用抗原和抗體的特異性結合以及細菌的ProteinA或G特異性地結合到免疫球蛋白的Fc片段的原理開發出來的方法。其基本原理是，為了研究細胞中蛋白A與蛋白B是否結合，在細胞裂解液中加入抗蛋白A的抗體，孵育后再加入與抗體特異結合的結合于Agarose珠上的ProteinA或G，若細胞中有與蛋白A結合的蛋白B，就可以形成這樣一種復合物：“蛋白B—蛋白A—抗蛋白A抗體—agaroseProteinA或G”，經變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，復合物又被分開。蛋白B然后經western blot或質譜檢測目的蛋白。蛋白A這種方法得到的蛋白B是在細胞內與興趣蛋白天然結合的，符合體內實際情況，得到的結果可信度高。
        

二、技術流程

        1、收集經過處理的細胞，加入適量細胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30 min, 細胞裂解液于4°C，12000轉離心30 min后取上清；
        2、取少量裂解液以備免疫印跡分析，剩余裂解液中加入適量的相應抗體，4 °C緩慢搖晃孵育過夜；
        3、取10μL protein A 或GAgarose珠，用適量裂解緩沖液洗3次，每次3000 rpm離心3 min；
        4、將預處理過的10 μl protein A 或G瓊脂糖珠加入到經過與抗體孵育的細胞裂解液中，4 °C緩慢搖晃孵育2~4h，使抗體與protein A或GAgarose珠偶聯；
        5、免疫沉淀反應后，在4 °C以3000 rpm 速度離心3min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1mL裂解緩沖液洗3－4次；最后加入15 μL的3×SDS 上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；
        6、SDS-PAGE, 免疫印跡或質譜儀分析。
 

三、樣品要求

        1、顧客提供：蛋白質樣品（組織、細胞、蛋白質溶液等）、用于免疫共沉淀的一抗及目的蛋白的相關信息；
        2、需要通過轉染載體表達基因的，提供表達載體，或由本公司構建載體；
        3、其他免疫共沉淀相關信息。
        運輸要求：干冰包裝寄送

四、報告內容及標準

        1、免疫共沉淀電子圖片及分析結果；
        2、相互作用蛋白鑒定結果，質譜鑒定結果和（或）western blot鑒定結果；
        3、完整的實驗步驟、軟件檢索等參數
        根據甲方要求而制定具體的內容，詳細請依所簽約合同的內容為準。
 
 
五、收費標準及服務周期

        收費標準及服務周期因根據客戶提供的樣品不同而有所改變，詳細請跟客服專員聯系或參考所簽署的合作合同。
 
 

六、質量保證

        提供客觀、公正的免疫共沉淀實驗結果

 
七、售后服務

        本公司會不定期進行顧客回訪，以提高我們的服務質量。本條款以所簽訂的合作合同為依歸，詳情會因合同內容的不同而有所差異。
 

漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]是一家專門從事生物技術服務和產品銷售與研發的高科技企業，公司專注于為廣大科研工作者提供腺病毒、慢病毒、逆轉錄病毒包裝、細胞穩定株篩選、siRNA設計和microRNA研究服務。漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]自成立之日起，就以“為客戶提供最優質的服務和品質卓越的產品”為宗旨，憑借國際先進的實驗設備和經驗豐富的實驗技術人員，獲得了中國頂級病毒包裝供應商的美譽，是全國唯一一家可以提供病毒現貨的公司。漢恒生物科技（上海）有限公司[簡稱漢恒生物]提供的產品和服務具有產品質量好、滴度高、服務優及周期短等特點。