漢恒為您提供Q-PCR檢測服務(wù)啦!
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實時熒光定量PCR檢測
熒光定量PCR也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。
其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。實時定量PCR是檢測基因表達(dá)最靈敏,最可靠的方法。檢測時間段,操作簡單,結(jié)果精確!
本公司提供服務(wù):
* 可根據(jù)您的需要設(shè)計引物或者探針
* 為您抽提DNA、RNA,并對RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄
* 實時熒光定量PCR對標(biāo)本進(jìn)行定量檢測
* 也可根據(jù)需要對標(biāo)本進(jìn)行基因突變的檢測等
* 提供完整的實驗結(jié)果報告
顧客需提供以下信息:
* 樣本的生物物種信息(Human、Mouse、Rat)
* 目的基因信息(GeneBank Acc、GeneID、關(guān)鍵詞)
* 引物設(shè)計的區(qū)域范圍(全序列、5’端序列、3’端序列)
* 客戶需提供新鮮的足量材料(細(xì)胞數(shù)107個以上,組織100mg以上)
* 樣品-80℃(干冰或液氮)運(yùn)送以保證樣品質(zhì)量
* 如提供的DNA或RNA樣品(5μg以上),客戶須注明濃度
細(xì)胞樣本的準(zhǔn)備及運(yùn)輸:
去掉培養(yǎng)液,用PBS洗一次后,加入少量PBS,用細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下,用1ml槍吸取細(xì)胞置于1.5ml EP管中,快速離心(升至最高轉(zhuǎn)速即可停止)后去除上清。
可按下面兩種方法運(yùn)輸:
1、將含有細(xì)胞的EP管放入液氮速凍,液氮或者干冰運(yùn)輸,-80℃保存;
2、加入一定量的TRIzol冷藏運(yùn)輸(冰袋或者冰盒),-80℃保存。
QPCR檢測實驗結(jié)果圖實例:
Real time PCR檢測GRM7基因的表達(dá)量
GAPDH擴(kuò)增曲線和融解曲線
GRM5擴(kuò)增曲線和融解曲線
結(jié)果分析
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