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深度空間代謝組學(xué)常見Q&A(技術(shù)介紹及樣本準(zhǔn)備)

瀏覽次數(shù):1563 發(fā)布日期:2022-4-22  來源:中科新生命
空間代謝組學(xué)作為一種新技術(shù),很多老師們開展實驗前對于樣本準(zhǔn)備和前處理存在很多疑問,本文總結(jié)了開展項目和樣本前處理的常見問題供大家參考。

Q1 什么是空間代謝組學(xué)?
空間代謝組學(xué)(Spatial Metabolomics)基于質(zhì)譜成像(Mass Spectrometry Imaging,MSI)開發(fā),能夠直接從生物組織中獲得大量已知或未知的內(nèi)源性代謝物和外源性藥物等分子的結(jié)構(gòu)、含量和空間分布信息,避免通過勻漿處理樣本,造成的代謝物空間信息丟失,實現(xiàn)空間水平高分辨率且能精準(zhǔn)定位組織中的代謝物分布。對組織中的代謝異質(zhì)研究、積累和調(diào)控機理至關(guān)重要。

Q2 空間代謝組的工作流程是什么?


圖1 空間代謝組學(xué)工作流程

中科新生命深度空間代謝組學(xué)提供由切片到分析的完整深度空間代謝組學(xué)解決方案,基于Bruker最新質(zhì)譜成像平臺TIMS-TOF flex MALDI 2搭建,同時可開展靶向檢測與非靶向探索兩種模式,結(jié)合多功能集成成像分析工作站可以滿足多元化分析檢測需求,小伙伴們僅需準(zhǔn)備好組織樣本即可開展實驗。

Q3 什么樣本可以用來做空間代謝組分析?
理論上可以被制備成切片的組織樣本均可以開展空間代謝組學(xué)分析,在準(zhǔn)備過程中需要注意樣本中代謝物種類、含量和空間分布不受到非實驗因素影響,所以通常使用新鮮組織樣本進行空間代謝組學(xué)分析。另一方面大家比較關(guān)注FFPE類樣本,因為其在脫水及固定的過程中代謝物伴隨各類溶劑大量流失,空間分布發(fā)生變化,導(dǎo)致最終檢測效果無法真實反應(yīng)表型,所以不推薦使用。

Q4 要制備一張高質(zhì)量的切片,送樣前處理應(yīng)該做什么?
最佳推薦方法是使用10%的CMC通過異戊烷+干冰速凍對組織進行包埋。其中異戊烷與干冰一起使用可以達(dá)到比較理想的控溫效果,極大程度減少組織中因速凍產(chǎn)生的冰晶,可以在速凍保持代謝物狀態(tài)的同時,維持較好組織的形態(tài)。


圖2 推薦包埋流程
如果實驗中缺乏包埋條件,也可以選擇干冰或者液氮直接速凍,后續(xù)再由我司進行包埋,但是這種方法可能會導(dǎo)致組織內(nèi)部產(chǎn)生較多冰晶。
*具體操作方法請聯(lián)系我們并索要《中科新生命深度的空間代謝組學(xué)送樣建議》

Q5 樣本可以保存多久?可以分批采樣嗎?
可以分批采樣,樣本在-80℃條件下可以長期保存,樣本盡可能保存于低溫冰箱深處并保持與空氣隔離,可以有效防止外部水汽在樣本表面凝結(jié)形成冰晶或者凍融導(dǎo)致樣本結(jié)構(gòu)形態(tài)產(chǎn)生變化。

Q6 可以直接送切片樣本進行空間代謝組學(xué)分析嗎?
可以,自制切片可以節(jié)省溝通時間,加快實驗周期。需要注意的是空間代謝組學(xué)樣本需放置于導(dǎo)電載玻片上,如自制切片請?zhí)崆奥?lián)系我們寄送導(dǎo)電載玻片,標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)電載玻片規(guī)格為2.5cm * 7.5cm,切片放置區(qū)域為下圖紅框標(biāo)定的定位孔內(nèi)。


圖3 導(dǎo)電載玻片
 
Q7 直接寄送組織類樣本后,如何開展切片實驗?zāi)兀?/strong>
送樣后技術(shù)部會與您溝通時間,以在線實時的形式,共同完成切片與H&E染色,直到確認(rèn)上機檢測的切片。

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發(fā)布者:上海中科新生命生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-54665263
E-mail:marketing@aptbiotech.com

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