以慢病毒載體為例，慢病毒與宿主細(xì)胞表面的受體結(jié)合后，它會(huì)通過受體結(jié)合的方式來進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)將外源基因釋放到細(xì)胞質(zhì)中，由于細(xì)胞核是多孔的結(jié)構(gòu)，所以病毒的遺傳物質(zhì)很容易入核，并在細(xì)胞核中表達(dá)。

①轉(zhuǎn)染前準(zhǔn)備： 嚴(yán)格控制起始轉(zhuǎn)染細(xì)胞梳理。選擇細(xì)胞計(jì)數(shù)儀精準(zhǔn)測定細(xì)胞密度，確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞處于最佳生長狀態(tài)（如70-80%匯合度），避免因細(xì)胞量偏差導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗！
②實(shí)時(shí)監(jiān)控、數(shù)據(jù)可靠：活細(xì)胞成像儀全程無創(chuàng)追蹤轉(zhuǎn)染后細(xì)胞動(dòng)態(tài)：從病毒吸附到基因表達(dá)，熒光標(biāo)記一目了然！還能分析細(xì)胞存活率，告別“盲測”時(shí)代。支持長時(shí)間動(dòng)態(tài)追蹤，減少人工取樣誤差，提供有效數(shù)據(jù)。
③轉(zhuǎn)染效率快速檢測：前期確認(rèn)合適轉(zhuǎn)染條件后，考慮外來基因整合到宿主細(xì)胞長期傳代可能導(dǎo)致目的基因丟失，可借助細(xì)胞分析儀對(duì)細(xì)胞熒光表達(dá)進(jìn)行鑒定。通過細(xì)胞分析儀能夠非常直觀地判斷出長期傳代后的基因表達(dá)水平，并及時(shí)對(duì)丟失掉目的基因的細(xì)胞進(jìn)行再次轉(zhuǎn)染，穩(wěn)定基因表達(dá)強(qiáng)度。

病毒轉(zhuǎn)染專屬實(shí)驗(yàn)流程

①選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板并接種適量的細(xì)胞
②基于實(shí)驗(yàn)需求，設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組
③質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
④細(xì)胞樣本置于培養(yǎng)箱中活細(xì)胞成像儀上穩(wěn)定培養(yǎng)觀察記錄
⑤轉(zhuǎn)染結(jié)果分析，使用JuLI Stage活細(xì)胞成像儀延時(shí)成像監(jiān)測，自動(dòng)生成視頻，基于圖像進(jìn)行轉(zhuǎn)染效率定量
 

 

JuLI Stage 活細(xì)胞成像儀助力轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)案例

維也納醫(yī)科大學(xué)癌癥研究中心實(shí)驗(yàn)組于Drug Resistance Updates ( IF 15.8 ) 發(fā)表文獻(xiàn)，其中HEK293 細(xì)胞中轉(zhuǎn)染 pRetroX-G1-mCherry-puro，向細(xì)胞中加入多柔比星 （DOX）、 順鉑 （CIS） 或奧拉帕尼 （OLA）處理120 小時(shí)，使用JuLI Stage活細(xì)胞成像儀每半小時(shí)拍攝一次，監(jiān)測轉(zhuǎn)基因表達(dá)。通過結(jié)果可以實(shí)時(shí)對(duì)比觀察在不同處理下轉(zhuǎn)染效率的差異，與對(duì)照組相比，細(xì)胞處理后在 G1 期逐漸積累，導(dǎo)致生長停滯。
 
高效轉(zhuǎn)染，工具先行！病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的挑戰(zhàn)在于細(xì)節(jié)的把控。精準(zhǔn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)是成功的前提，實(shí)時(shí)的活細(xì)胞成像則是洞察過程、驗(yàn)證結(jié)果的利器。細(xì)胞計(jì)數(shù)儀與活細(xì)胞成像儀的強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合，通過提供起始點(diǎn)的精確性和全過程的透明化，真正實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)效率的“翻倍”。告別模糊與猜測，擁抱精準(zhǔn)與高效——讓這兩款必備工具成為您病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)流程中的標(biāo)準(zhǔn)配置，顯著提升您的研究產(chǎn)出與成功率。