Amplite試劑盒(AAT Bioquest開發(fā))是一系列基于熒光法或比色法的檢測試劑盒,適用于多種生物分子和生化反應的定量分析。
一、Amplite™ 試劑盒的核心優(yōu)勢
高靈敏度與寬動態(tài)范圍
熒光法檢測限低至 nM~pM級(如ATP檢測靈敏度達0.1 nM),適合微量樣本(如原代細胞、微量體液)。
比色法線性范圍寬,適用于高濃度樣本(如培養(yǎng)基中的葡萄糖)。
操作簡便
•“Mix-and-Read” 設計:無需復雜步驟,多數(shù)試劑盒僅需一步孵育(10~30分鐘)。
• 兼容高通量篩選(HTS),適合96/384孔板自動化檢測。
優(yōu)異的抗干擾能力
• 專利熒光染料(如 Resorufin、DDAO)可減少樣本自發(fā)熒光干擾,提高信噪比。
• 部分試劑盒含內參校正(如雙波長檢測),適用于復雜樣本(血清、組織勻漿)。
靈活適配性
• 提供熒光(Ex/Em 可調)和 比色(可見光檢測)雙平臺選擇,匹配不同實驗室設備。
• 與哺乳動物細胞、細菌、植物樣本兼容,且無需毒性溶劑(如DMSO)。
穩(wěn)定性強
• 試劑預混優(yōu)化,常溫運輸,4℃保存期長達6個月。
二、Amplite™ 試劑盒的主要應用范圍
1. 氧化應激與抗氧化研究
檢測目標:H₂O₂、超氧陰離子(O₂⁻)、總ROS、抗氧化劑(如GSH)。
應用場景:
• 神經(jīng)退行性疾。ㄈ绨柎暮DY)中的氧化損傷機制。
• 藥物/天然產物的抗氧化能力評價(如篩選抗衰老化合物)。
2. 能量代謝監(jiān)測
檢測目標:ATP、葡萄糖、乳酸、NAD+/NADH。
應用場景:
• 腫瘤細胞糖酵解(Warburg效應)研究。
• 線粒體功能異常相關疾。ㄈ缣悄虿 ⒋x綜合征)。
3. 細胞功能分析
檢測目標:細胞活力、凋亡、增殖(如LDH、蛋白酶活性)。
應用場景:
• 抗癌藥物毒性篩選(結合IC50計算)。
• 免疫細胞激活狀態(tài)評估(如T細胞耗竭模型)。
4. 酶學與信號通路研究
檢測目標:激酶、磷酸酶、蛋白酶(如Caspase-3)、乙酰膽堿酯酶。
應用場景:
• 激酶抑制劑開發(fā)(如EGFR、MAPK通路藥物篩選)。
• 神經(jīng)遞質代謝調控(如乙酰膽堿降解速率檢測)。
5. 微生物與感染研究
檢測目標:細菌生物膜、β-內酰胺酶活性、硝酸還原酶。
應用場景:
• 抗生素耐藥性機制研究。
• 益生菌代謝活性分析。
三、常見類型以及應用場景
1. 活性氧(ROS)與氧化應激檢測
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H₂O₂) Assay Kit(熒光法檢測過氧化氫)
Amplite™ Colorimetric Total ROS Assay Kit(比色法檢測總活性氧)
應用
• 氧化應激研究(如細胞凋亡、炎癥)
• 抗氧化劑活性評價(如藥物篩選)
2. 葡萄糖代謝檢測
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Glucose Assay Kit(熒光法,高靈敏度)
Amplite™ Colorimetric Glucose Assay Kit(比色法,適用于常規(guī)檢測)
應用
• 細胞/培養(yǎng)基中葡萄糖消耗監(jiān)測
• 糖尿病研究或糖代謝相關酶活性分析
3. 細胞活力與增殖檢測
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric ATP Assay Kit(通過ATP含量間接反映細胞活力)
Amplite™ Cell Viability Kits(基于熒光信號)
應用
• 藥物毒性測試
• 腫瘤細胞增殖研究
4. 酶活性檢測適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Protease Assay Kit(蛋白酶活性)
Amplite™ Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits(磷酸酶/ALP活性)
應用
• 酶抑制劑篩選(如激酶、水解酶)
• 信號通路研究(如磷酸化/去磷酸化)
圖示:
圖為使用NOVOstar酶標儀(BMG Labtech),在具有Amplite 熒光馬來酰亞胺定量測定試劑盒的96孔板(黑色)中測量N-乙基馬來酰亞胺劑量響應。