Amplite試劑盒(AAT Bioquest開(kāi)發(fā))是一系列基于熒光法或比色法的檢測(cè)試劑盒,適用于多種生物分子和生化反應(yīng)的定量分析。
一、Amplite™ 試劑盒的核心優(yōu)勢(shì)
高靈敏度與寬動(dòng)態(tài)范圍
熒光法檢測(cè)限低至 nM~pM級(jí)(如ATP檢測(cè)靈敏度達(dá)0.1 nM),適合微量樣本(如原代細(xì)胞、微量體液)。
比色法線性范圍寬,適用于高濃度樣本(如培養(yǎng)基中的葡萄糖)。
操作簡(jiǎn)便
•“Mix-and-Read” 設(shè)計(jì):無(wú)需復(fù)雜步驟,多數(shù)試劑盒僅需一步孵育(10~30分鐘)。
• 兼容高通量篩選(HTS),適合96/384孔板自動(dòng)化檢測(cè)。
優(yōu)異的抗干擾能力
• 專利熒光染料(如 Resorufin、DDAO)可減少樣本自發(fā)熒光干擾,提高信噪比。
• 部分試劑盒含內(nèi)參校正(如雙波長(zhǎng)檢測(cè)),適用于復(fù)雜樣本(血清、組織勻漿)。
靈活適配性
• 提供熒光(Ex/Em 可調(diào))和 比色(可見(jiàn)光檢測(cè))雙平臺(tái)選擇,匹配不同實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。
• 與哺乳動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌、植物樣本兼容,且無(wú)需毒性溶劑(如DMSO)。
穩(wěn)定性強(qiáng)
• 試劑預(yù)混優(yōu)化,常溫運(yùn)輸,4℃保存期長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。
二、Amplite™ 試劑盒的主要應(yīng)用范圍
1. 氧化應(yīng)激與抗氧化研究
檢測(cè)目標(biāo):H₂O₂、超氧陰離子(O₂⁻)、總ROS、抗氧化劑(如GSH)。
應(yīng)用場(chǎng)景:
• 神經(jīng)退行性疾病(如阿爾茨海默癥)中的氧化損傷機(jī)制。
• 藥物/天然產(chǎn)物的抗氧化能力評(píng)價(jià)(如篩選抗衰老化合物)。
2. 能量代謝監(jiān)測(cè)
檢測(cè)目標(biāo):ATP、葡萄糖、乳酸、NAD+/NADH。
應(yīng)用場(chǎng)景:
• 腫瘤細(xì)胞糖酵解(Warburg效應(yīng))研究。
• 線粒體功能異常相關(guān)疾病(如糖尿病、代謝綜合征)。
3. 細(xì)胞功能分析
檢測(cè)目標(biāo):細(xì)胞活力、凋亡、增殖(如LDH、蛋白酶活性)。
應(yīng)用場(chǎng)景:
• 抗癌藥物毒性篩選(結(jié)合IC50計(jì)算)。
• 免疫細(xì)胞激活狀態(tài)評(píng)估(如T細(xì)胞耗竭模型)。
4. 酶學(xué)與信號(hào)通路研究
檢測(cè)目標(biāo):激酶、磷酸酶、蛋白酶(如Caspase-3)、乙酰膽堿酯酶。
應(yīng)用場(chǎng)景:
• 激酶抑制劑開(kāi)發(fā)(如EGFR、MAPK通路藥物篩選)。
• 神經(jīng)遞質(zhì)代謝調(diào)控(如乙酰膽堿降解速率檢測(cè))。
5. 微生物與感染研究
檢測(cè)目標(biāo):細(xì)菌生物膜、β-內(nèi)酰胺酶活性、硝酸還原酶。
應(yīng)用場(chǎng)景:
• 抗生素耐藥性機(jī)制研究。
• 益生菌代謝活性分析。
三、常見(jiàn)類型以及應(yīng)用場(chǎng)景
1. 活性氧(ROS)與氧化應(yīng)激檢測(cè)
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H₂O₂) Assay Kit(熒光法檢測(cè)過(guò)氧化氫)
Amplite™ Colorimetric Total ROS Assay Kit(比色法檢測(cè)總活性氧)
應(yīng)用
• 氧化應(yīng)激研究(如細(xì)胞凋亡、炎癥)
• 抗氧化劑活性評(píng)價(jià)(如藥物篩選)
2. 葡萄糖代謝檢測(cè)
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Glucose Assay Kit(熒光法,高靈敏度)
Amplite™ Colorimetric Glucose Assay Kit(比色法,適用于常規(guī)檢測(cè))
應(yīng)用
• 細(xì)胞/培養(yǎng)基中葡萄糖消耗監(jiān)測(cè)
• 糖尿病研究或糖代謝相關(guān)酶活性分析
3. 細(xì)胞活力與增殖檢測(cè)
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric ATP Assay Kit(通過(guò)ATP含量間接反映細(xì)胞活力)
Amplite™ Cell Viability Kits(基于熒光信號(hào))
應(yīng)用
• 藥物毒性測(cè)試
• 腫瘤細(xì)胞增殖研究
4. 酶活性檢測(cè)適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Protease Assay Kit(蛋白酶活性)
Amplite™ Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits(磷酸酶/ALP活性)
應(yīng)用
• 酶抑制劑篩選(如激酶、水解酶)
• 信號(hào)通路研究(如磷酸化/去磷酸化)
圖示:
圖為使用NOVOstar酶標(biāo)儀(BMG Labtech),在具有Amplite 熒光馬來(lái)酰亞胺定量測(cè)定試劑盒的96孔板(黑色)中測(cè)量N-乙基馬來(lái)酰亞胺劑量響應(yīng)。