代謝功能障礙相關性脂肪肝炎（MASH），之前稱為非酒精性脂肪肝炎（NASH），是一種慢性肝臟疾病。這種疾病通常源于代謝障礙相關性脂肪肝病（MASLD）、肥胖或糖尿病等，導致肝臟脂肪積累，異常的脂肪堆積可進一步引起炎癥。如果沒有及時干預會發展成肝臟纖維化，可能會進展為肝硬化或肝癌（HCC）^[1]。今天，小賽要為大家介紹一款最新上線的HFD+CCl4誘導的MASH（NASH）小鼠。

HFD+CCl4誘導的MASH(NASH)小鼠構建方式
60%的高脂飲食（HFD）飼養12周的C57BL/6小鼠呈現肥胖、高血脂等癥狀，通過為期4周的CCL4誘導可使肝臟發生纖維化病變。Resmetirom（瑞司美替羅）每天灌胃治療四周后，可顯著降低高血脂、肝臟脂質堆積、纖維化等表型。
 

圖1 HFD+CCl4誘導的MASH(NASH)小鼠研究概況

HFD+CCl4誘導的MASH(NASH)小鼠藥效數據

圖2 給藥期間小鼠體重的變化曲線及試驗終點肝重指標

HFD誘導12-16周的小鼠體重和肝重均升高，其中體重可達40g以上。治療四周后，Resmetirom可顯著降低動物體重和肝重。*P<0.05，與高脂飲食對照組差異顯著。數據表示為平均值±標準誤。*P<0.05視為具有統計學意義，采用單因素方差分析。
 

圖3 小鼠總膽固醇（TC）水平、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平

圖4 丙氨酸氨基轉移酶（ALT）水平及天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）水平

治療期間給予CCL4后檢測肝功指標，發現CCL4顯著提高了ALT和AST的水平，治療組的Resmetirom降低了CCL4誘導的血清中ALT和AST水平。數據表示為平均值±標準誤，n=5。#P<0.05、##P<0.005與正常對照組比較；*P<0.05、**P<0.005與高脂飲食+CCL4組比較，采用單因素方差分析。
 

圖5 小鼠肝臟病理組織學檢測結果：HE染色、NAS評分、ORO染色與PSR染色

4周治療后，Resmetirom保護了HFD和HFD+CCL4誘導的肝臟脂肪變性和氣球樣變。藍色箭頭表示脂肪變性，綠色箭頭表示小葉炎，黑色箭頭表示氣球樣變。脂肪變性（0-3分）、小葉炎癥（0-3分）、氣球樣變（0-2分）、NAS評分（0-8分）。數據表示為平均值±標準誤，n=5。
 

圖6 肝α-平滑肌肌動蛋白α-SMA(Acta2)mRNA及一型膠原蛋白（Collagen 1α1）mRNA的水平表達
 

4周治療后，Resmetirom抑制了由HFD+CCL4顯著誘導的肝纖維化標志物的mRNA水平。數據表示為平均值±標準誤，n=5。*P<0.05，**P<0.005，****P<0.001，采用單因素方差分析。
 

總  結

高脂飲食（HFD）誘導12周的小鼠（DIO）較普通飼料喂養的小鼠增加了體重和肝臟的重量。DIO小鼠血清中的TC、HDL-C和LDL-C的水平顯著增加，較好地模擬了MASH的癥狀。DIO小鼠與四氯化碳（CCL4）的組合可以加速和惡化MASH小鼠模型的病理過程，HFD+CCL4組較HFD組顯著升高了血清中ALT和AST的水平，代表CCL4誘導肝臟發生了進一步的損傷。CCL4縮短了誘導時間，并加重了DIO小鼠肝纖維化。這種模型廣泛用于臨床前藥效研究以評估新藥對MASH的治療和保護作用。Resmetirom對DIO+CCL4誘導的MASH模型具有保護和治療作用，可以有效減少脂肪變性和纖維化。

以上模型為研究代謝功能障礙相關性脂肪肝炎提供了重要工具，有助于更深入地理解這種疾病的發病機制，并為開發新的治療方法提供可能。此外，賽業生物還提供多種用于代謝和心血管疾病研究的基因編輯和誘導模型，以滿足研發人員在相關研究領域的實驗需求。

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參考文獻：
[1] Shuang Wang and Scott L. Found in Translation – Fibrosis in Metabolic Dysfunction-Associated Steatohepatitis (MASH). Sci Transl Med. 2023 Oct 4; 15(716).