➢可以直接在已有的野生型人源化基礎(chǔ)上定制不同的點(diǎn)突變，提高效率及成功率；

➢人源化區(qū)域包括大部分藥物靶向區(qū)域，更適合可用于藥物篩選及藥效研究，特別是ASO、CRISPR、siRNA等基因治療相關(guān)藥物；

➢人DMD基因原位插入，拷貝數(shù)確定，可穩(wěn)定遺傳。

FSHD的致病機(jī)理及基因治療

FSHD分為FSHD1和FSHD2兩種類型，盡管其致病機(jī)制不同，但最終結(jié)果都是DUX4（Double homeo-box 4）基因在骨骼肌中異常表達(dá)或DUX4蛋白功能異常。患者中95%為1型，F(xiàn)SHD1型的致病原因主要與4號(hào)染色體長(zhǎng)臂亞端粒區(qū)內(nèi)的D4Z4大衛(wèi)星串聯(lián)重復(fù)序列的多拷貝缺失相關(guān)，導(dǎo)致DUX4基因的甲基化程度降低，使其在骨骼肌中去抑制重新表達(dá)而致病。

基因治療主要以通過(guò)ASO和siRNA抑制毒蛋白DUX4表達(dá)為主^[2]，使用到的模型有兩類，分別是FLExDUX4小鼠（誘導(dǎo)型）^[3]和注射AAV表達(dá)DUX4小鼠^[4]，賽業(yè)生物自主研發(fā)AAV表達(dá)DUX4小鼠模型，可更好地用于基因治療藥物臨床前研究。

DM的致病機(jī)理及基因治療

DM分為DM1和DM2兩種類型，其中DM1占絕大多數(shù)，致病機(jī)理是由DMPK基因3’非翻譯區(qū)不穩(wěn)定的CTG重復(fù)片段異常擴(kuò)增導(dǎo)致RNA結(jié)合蛋白調(diào)節(jié)紊亂、mRNA異常剪接，相應(yīng)引起多種組織缺陷，進(jìn)而出現(xiàn)DM多系統(tǒng)受累。基因治療主要以通過(guò)ASO和siRNA抑制DMPK表達(dá)為主，使用的模型以DMPK轉(zhuǎn)基因（帶有多個(gè)CTG重復(fù)）^[5]和HSALR轉(zhuǎn)基因小鼠^[6]為主，賽業(yè)生物自主構(gòu)建了這兩種轉(zhuǎn)基因模型，可適用于DM1臨床前研究。

LGMD的致病機(jī)理及基因治療

LGMD是一類以肢帶區(qū)域或肩膀和臀部周圍的肌肉萎縮為主要癥狀的神經(jīng)肌肉疾病的統(tǒng)稱，一般將LGMD分為常染色體顯性遺傳1型和常染色隱性遺傳2型。致病基因大多與影響肌肉功能性蛋白質(zhì)產(chǎn)生的基因突變有關(guān)，主要有DYSF、SCGA、SGCB等。基因治療主要通過(guò)AAV遞送療法來(lái)補(bǔ)充缺失蛋白來(lái)治療，當(dāng)然文獻(xiàn)中也有一些關(guān)于ASO跳躍療法的研究。基于致病機(jī)理及基因療法，賽業(yè)生物自主研發(fā)了hDYSF（WT、MU）、Dysf-KO、Scgs-KO、Sgcb-KO等^[7]小鼠模型，用于助力LGMD疾病的臨床前藥物研發(fā)。

HUGO-GT^TM全基因組人源化模型構(gòu)建計(jì)劃

不僅是肌營(yíng)養(yǎng)不良癥，針對(duì)視網(wǎng)膜色素變性（RP）、黃斑變性（AMD）、帕金森病（PD）等多種疾病類型，如果要深入研究其致病機(jī)理，長(zhǎng)片段甚至全基因組人源化小鼠是更好的選擇。但全基因組替換所需的技術(shù)難度高，大規(guī)模引入的外源序列可能會(huì)影響原本基因的表達(dá)調(diào)控。

為此，賽業(yè)生物啟動(dòng)了HUGO-GT^TM計(jì)劃，基于自主研發(fā)的TurboKnockout-Pro技術(shù)，對(duì)鼠源基因?qū)崿F(xiàn)原位替換，成功構(gòu)建了涵蓋更豐富干預(yù)靶點(diǎn)的全基因組人源化小鼠。HUGO-GT^TM小鼠搭載了更高效的大片段載體融合技術(shù)，可以作為萬(wàn)能模板進(jìn)行針對(duì)性的突變定制服務(wù)，是更貼近真實(shí)世界生物機(jī)制的藥物臨床前研究模型。

注：HUGO-GT^TM即Humanized Genomic Ortholog for Gene Therapy

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