技術介紹 | 類黃酮廣靶代謝組學
類黃酮廣靶代謝組學數據庫
- 自建數據庫：自建類黃酮標準品數據庫，確保定性結果準確可靠。
- 定性準：基于標準品開發方法，樣本中代謝物二級譜與標準品二級譜逐一核對。
- 高特異性：優化的類黃酮前處理方法；合適的色譜質譜檢測條件；每個項目均進行標準品驗證。
- 高靈敏度：AB SCIEX 6500 Qtrap高靈敏度的質譜系統，實現對極低含量的類黃酮準確鑒定。
2.技術路線
3.技術參數
- 樣本要求
植物組織 鮮樣 2g，干樣 1g，凍干粉：250 mg
- 儲存和運輸
液氮或-80℃保存；足量干冰運輸，避免反復凍融。
- 檢測平臺
AB Sciex QTRAP®6500+
4.應用方向
- 非生物脅迫：抗氧化；延緩衰老。
- 生物脅迫：植物抗蟲；植物抗病。
- 疾病防治：抗癌；抗菌消炎；心腦血管疾病。
- 生長發育：種子萌發；營養色澤。
5.案例分析
廣泛靶向代謝組學研究兩種紅豆杉中黃酮類化合物的代謝變化
研究對象：紅豆杉
期刊：Molecules
影響因子：3.267
時間：2019年
研究背景：
紅豆杉是世界上公認的瀕臨滅絕的天然珍稀抗癌植物。黃酮類化合物具有多種生物學功能，參與植物生長發育過程中的防御和抗性反應、改善營養元素的利用與花粉萌發的關系，也顯示出廣泛藥理活性包括抗氧化、抗腫瘤、抗白血病、抗炎和免疫調節的影響，但在紅豆杉中作為主要生物活性成分的研究尚未廣泛開展。
結果展示：
兩種紅豆杉中的總黃酮檢測發現T. media品種總黃酮含量較T. mairei中高。廣泛靶向代謝組分析共鑒定出197種黃酮代謝物，其中有37種黃酮類代謝物只存在于其中一個品種，紅色字母表示T. media主要積累代謝物；綠色字母表示T. mairei主要積累代謝物。
通過對差異黃酮代謝物進行KEGG分類與富集分析，發現兩種紅豆杉中差異的類黃酮代謝產物參與花青素生物合成、黃酮和黃酮醇生物合成、異類黃酮生物合成和苯丙素類生物合成途徑。這可能是導致兩種紅豆杉總黃酮含量差異的原因。
思路總結：
基于LC-MS/MS的廣泛靶向代謝組分析，系統地比較了紅豆杉品種間的類黃酮總含量及種類差異，提供了紅豆杉這一重要植物的黃酮類代謝物組成和豐度的全面信息。結果表明，兩種紅豆杉中黃酮類物質的總量和種類存在差異，為了解兩個品種紅豆杉黃酮代謝產物的多樣性提供了新的思路，為紅豆杉物種的充分利用和新藥物的開發提供了理論依據。
實驗結果：
作者對兩個品種紅豆杉進行了基于LC-MS / MS的廣泛靶向代謝組分析。共鑒定出197種黃酮代謝物（包括70種黃酮，42種黃酮醇，26種黃酮糖苷，15種花青素和13種異黃酮等）。結果表明，有37種黃酮類代謝物只存在于其中一個品種，有42種黃酮類代謝物在兩個品種的紅豆杉中表現出特定的代謝模式。
