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病毒包裝技術8——病毒包裝實驗經(jīng)驗總結(jié)介紹

瀏覽次數(shù):1605 發(fā)布日期:2015-7-3  來源:銳賽生物
銳賽小課堂常識篇0703-115
病毒包裝實驗經(jīng)驗總結(jié)

第一,細胞狀態(tài)、載體系統(tǒng)、目的基因?qū)Σ《景b影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等)是三個主要影響病毒質(zhì)量的因素。

第二,細胞狀態(tài)需要有豐富的細胞培養(yǎng)經(jīng)驗來判斷,比如包裝或轉(zhuǎn)染感染前一定要重視細胞干凈細微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細胞密度適中否等性狀。另外轉(zhuǎn)染時細胞的密度要十分注意一般在70%左右。

第三,建議使用商品化的成熟毒載體系統(tǒng)

第四,至于包裝轉(zhuǎn)染時的操作控制細節(jié)及其轉(zhuǎn)染試劑因素,需要注意,不要在中途細胞被污染導致整個過程都需要重復

第五,另一個需要關注是目的基因的表達載體構(gòu)建和抽提純化環(huán)節(jié),中抽純化是否污染,純度是否到達要求等。這些環(huán)節(jié)也是保證病毒質(zhì)量的關鍵環(huán)節(jié)

第六,目的基因的大小、序列情況、該目的蛋白的功能毒性等能影響導致包裝成功與否,我們可以通過更換病毒包裝載體系統(tǒng),嘗試其他載體系統(tǒng)來實現(xiàn)目的。

持續(xù)發(fā)布中......

參考鏈接:http://www.research-bio.com/h-col-159.html​
發(fā)布者:上海銳賽生物技術有限公司
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