限制性內切酶不僅在分子克隆中有著廣泛應用，還可以應用于疫苗研發生產、基因測序、SNP 鑒定、ddPCR 等領域。在往期的內容中，我們已經介紹了什么是限制性內切酶以及內切酶的分類，本期就來為大家盤點一下在使用內切酶過程中最容易出現的問題以及解決方法 。

限制性內切酶的名稱通常由其來源物種的分類決定，屬名首字母 + 種名前兩位字母 + 血清型/菌株 + 同菌株的多種限制酶流水號羅馬數字。

為了方便大家理解，咱們以 Hind III  為例：

▐  問題 1：酶切不完全

▐  問題 2：酶切后 DNA 瓊脂糖凝膠電泳呈彌散狀

▐  問題 3：膠中條帶與預期不符

▐  問題 4：克隆很少或沒有

▐  問題 5：假陽性過多

限制性內切酶在實驗中的應用非常廣泛，實驗過程中會遇到的問題也多種多樣。有了小 M 給大家總結的各類實驗問題及解決方案，相信大家的實驗會更加順利~

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