人神經母細胞瘤細胞（SH-SY5Y） 是于1970年建自骨瘤轉移灶的神經母細胞瘤 SK-N-SH細胞系經3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞的密度可高達106 cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性。基本形態上皮樣，多數貼壁，少數懸浮； 營養體系：推薦DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S。
 

表1 SH-SY5Y細胞基本信息

圖1 SH-SY5Y（人神經母細胞瘤細胞）
 

首先，我們討論的是SY5Y五天傳一代算不算正常？SH-SY5Y 增殖緩慢，再加上喜歡聚團生長，鏡下觀察融合率不高，但細胞簇實際密度大，需要5-7天才能達到80%以上的融合率，所以5-7天傳一代很正常（如圖2所示，融合率約為70%的SY5Y）。如果細胞培養達到一周都無法傳代，建議把細胞消化下來，接種到更小的孔板中，增加細胞密度，促進細胞生長。
 

接下來我們討論第二個話題SY5Y懸浮細胞過多正不正常？SY5Y的生長特點為大部分貼壁，呈上皮樣，有短觸角延伸出來，傾向于成簇生長，容易成團；少部分懸浮，圓潤有光澤。 如果SY5Y出現大量懸浮是不正常現象。如圖3所示，懸浮細胞居多的SY5Y。
 

圖2 懸浮細胞居多的SY5Y

如何解決這種情況呢？如果貼壁細胞生長狀態良好、密度適中，可以舍棄懸浮細胞；如果貼壁細胞很少，用胰酶消化并離心，將細胞用新鮮的完培重懸并接種到培養瓶，隔段時間觀察細胞是否貼壁。
 

最后我們討論一下不同營養體系培養的SY5Y形態差異大不大。我們對比了兩種營養體系培養的SY5Y細胞形態。體系一是DMEM+20%FBS-熱滅活，體系2是DMEM-F12 + 10%FBS（如圖4所示）。在培養的第2天和第5天進行了相應的形態比較。傳代第2天，低密度下，兩種營養體系培養的SY5Y形態沒有明顯區別，均為少數懸浮，多數呈上皮樣，有短觸角延伸出來，傾向于聚團生長；傳代第5天，體系2培養的SY5Y團塊話過于嚴重，細胞黏在一起，細胞輪廓難以分辨清楚，體系1細胞有略微聚團（SY5Y本身有聚團生長特性），細胞形態正常。體系1更適合細胞增殖。
 

圖3 兩種營養體系培養的SY5Y形態對比圖（兩種營養體系所用血清批號一致）