小鼠胸主動脈血管內皮細胞研究及應用
血管是生物體運送血液的管道，為機體正常的新陳代謝和生長提供必要的氧氣和營養(yǎng)物質，并輸送走有害物質。血管內皮細胞(vascular endothelial cells ,VECs)是血管壁與血液中間的分界細胞。人體VEC表面面積的總和達6000m2，細胞總量達1011，重量達1000-2000g。VEC的形態(tài)呈單層、扁平、梭形或多邊形。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力，調節(jié)血壓，抗血栓形成等有重要作用，具有相當活躍的內分泌和代謝功能，在血管通透性屏障、 免疫防御及炎性反應中起著極其重要的作用，在高血壓，心、腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。
量研究表明血管內皮細胞是許多心血管疾病或危險因子作用的重要靶器官，具有相當活躍的內分泌和代謝功能，血管內皮細胞涉及多種疾病的發(fā)病機制，因而建立血管內皮細胞體外分離培養(yǎng)方法對于研究內皮細胞特性、對作用于血管的藥物及抗腫瘤藥物的研發(fā)具有重要意義。大鼠主動脈血管內皮分離簡單，容易培養(yǎng)，可在體外連續(xù)傳代培養(yǎng)。目前關于血管內皮細胞的實驗研究主要集中于大鼠胸主動脈血管內皮細胞。而對于小鼠胸主動脈血管內皮細胞的研究相對較少。小鼠主動脈血管內皮細胞分離難度高，純度低，易受雜細胞污染，如成纖維細胞。小鼠胸主動脈血管內皮細胞對生長環(huán)境營養(yǎng)要求高，易老化，凍存后復蘇難。
大鼠主動脈內皮細胞細胞與小鼠主動脈內皮細胞形態(tài)上差別較大，大鼠主動脈內皮細胞胞體較大，形態(tài)偏梭形，傳代后增殖速度較快，傳代次數穩(wěn)定。血管內皮細胞的標記物有CD31、vWF、CD34、第Ⅷ因子等。CD31作為細胞標志物之一，近年來較多的被應用于血管內皮細胞的鑒定。
統獲取主動脈小鼠胸主動脈血管內皮細胞的分離方法有機械刮取法、血管內壁消化法、組織塊貼壁法等。其中機械刮取法容易對細胞造成損傷，影響細胞活性。血管內壁消化法是將內膜外翻進行消化，操作難度大。組織塊貼壁法操作簡單，但培養(yǎng)周期長，并且易受雜細胞污染。齊氏生物在總結前人方法的基礎上，應用改良的酶消化法，分離得到的小鼠胸主動脈血管細胞純度高，成活率高，增殖速度快，可用于高血壓，心、腦血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實驗的要求。
圖1 血管細胞組成
圖2 血管內皮細胞與疾病
量研究表明血管內皮細胞是許多心血管疾病或危險因子作用的重要靶器官，具有相當活躍的內分泌和代謝功能，血管內皮細胞涉及多種疾病的發(fā)病機制，因而建立血管內皮細胞體外分離培養(yǎng)方法對于研究內皮細胞特性、對作用于血管的藥物及抗腫瘤藥物的研發(fā)具有重要意義。大鼠主動脈血管內皮分離簡單，容易培養(yǎng)，可在體外連續(xù)傳代培養(yǎng)。目前關于血管內皮細胞的實驗研究主要集中于大鼠胸主動脈血管內皮細胞。而對于小鼠胸主動脈血管內皮細胞的研究相對較少。小鼠主動脈血管內皮細胞分離難度高，純度低，易受雜細胞污染，如成纖維細胞。小鼠胸主動脈血管內皮細胞對生長環(huán)境營養(yǎng)要求高，易老化，凍存后復蘇難。
圖3 大鼠胸主動脈血管內皮細胞
小鼠胸主動脈血管內皮細胞來源于成年小鼠胸主動脈組織，是鋪于血管內壁的一層多功能細胞，大多呈類圓形或多邊形，形成單層后呈鋪路石樣排列。圖4 小鼠胸主動脈血管內皮細胞
大鼠主動脈內皮細胞細胞與小鼠主動脈內皮細胞形態(tài)上差別較大，大鼠主動脈內皮細胞胞體較大，形態(tài)偏梭形，傳代后增殖速度較快，傳代次數穩(wěn)定。血管內皮細胞的標記物有CD31、vWF、CD34、第Ⅷ因子等。CD31作為細胞標志物之一，近年來較多的被應用于血管內皮細胞的鑒定。
圖5 小鼠胸主動脈血管內皮細胞 vWF免疫熒光鑒定圖(100×)
統獲取主動脈小鼠胸主動脈血管內皮細胞的分離方法有機械刮取法、血管內壁消化法、組織塊貼壁法等。其中機械刮取法容易對細胞造成損傷，影響細胞活性。血管內壁消化法是將內膜外翻進行消化，操作難度大。組織塊貼壁法操作簡單，但培養(yǎng)周期長，并且易受雜細胞污染。齊氏生物在總結前人方法的基礎上，應用改良的酶消化法，分離得到的小鼠胸主動脈血管細胞純度高，成活率高，增殖速度快，可用于高血壓，心、腦血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實驗的要求。
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內皮細胞
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