介紹：

本研究展示了如何在 SpectraMax® i3多功能酶標儀中應用CatchPoint® cAMP熒光試劑盒監測腺苷酸環化酶激活劑forskolin對HEK293細胞的影響(如圖1)。G蛋白偶聯受體(GPCRs)是重要的跨膜蛋白，能將胞外信號傳導入胞內，引起信號逐級放大的級聯反應，導致胞內某些蛋白活性或表達的改變[1]。3’, 5’-磷酸化環腺苷(cAMP)作為第二信使參與GPCR活化后的下游反應。當胞外配體作用于GPCR時，GPCR構象發生改變，激活胞內連接的G蛋白。接下來的信號傳導路徑與被激活的G蛋白類型有關。其中當Gs蛋白被激活時，會導致腺苷酸環化酶活化引起的胞內cAMP濃度上調，進一步激活蛋白激酶A，最終促進一些目標蛋白的磷酸化，這些目標蛋白可能參與了例如多巴胺神經信號傳導、葡萄糖再生反應、血管擴張、細胞有分裂、卵子成熟等重要生理生化過程[2-6]。CatchPoint® cAMP熒光檢測試劑盒采用免疫競爭原理測得cAMP濃度(如圖2)，僅需一步洗脫，且反應底物加入后短可放置10分鐘，長可延至24小時后再檢測，信號穩定靈敏。