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揭示TAOK3和SHP-1在T細胞的激活作用——蛋白的分離和純化

瀏覽次數(shù):706 發(fā)布日期:2024-11-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
"TAOK3對SHP-1豐度的調(diào)節(jié)作為T細胞受體(TCR)信號的調(diào)節(jié)器,決定了T淋巴細胞的激活閾值"
在識別調(diào)節(jié)T細胞激活的途徑方面已經(jīng)投入了大量努力。
 
在這些途徑中,因為在調(diào)節(jié)細胞增殖和凋亡方面的作用,以及其在T細胞的多種功能中的參與,如免疫突觸的形成和T淋巴細胞的記憶,使得Salvador-Warts-Hippo(SWH)途徑而脫穎而出。這條途徑涉及多個家族的蛋白激酶。
 
除了這條途徑的核心酶之外,本文聚焦于TAOKs(thousand-and-one amino acid kinases)和SHP-1(圖1)。因此,TAOK3對SHP-1豐度的調(diào)節(jié)作為T細胞受體(TCR)信號的調(diào)節(jié)器,決定了T淋巴細胞的激活閾值。
 
研究結(jié)果表明,TAOK3是一種對TCR信號至關重要的絲氨酸和蘇氨酸激酶。它的缺失導致TCR信號減少,并且酪氨酸磷酸酶SHP-1與激酶LCK的相互作用增加,LCK是TCR信號的關鍵下游介質(zhì)(圖1B)。
 
 
 
圖1.A:SHP-1-TAOK3相互作用模型結(jié)構和實驗確定的相互作用位點。
圖1.B:TAOK3介導的SHP-1降解和TCR信號調(diào)節(jié)模型。
 
為了得出這一結(jié)論,該研究的科學團隊進行了精確的分子和生化分析。在這些步驟之前,以最佳方式分離研究酶是至關重要的,以便獲得最可靠的結(jié)果。
 
科學家團隊使用來自ABT(Agarose Bead Technologies)的4% B Agarose Beads (50-150 μm) [A-1040S],用于純化和分離目標蛋白。
 
ABT的這種瓊脂糖微球在免疫沉淀(IP)過程中用于分離與T細胞受體信號和T細胞中TAOK3功能相關的特定蛋白質(zhì)。
 
選擇適當?shù)姆椒ㄒ赃_到盡可能高的純度至關重要,這對于進行科學有效的研究是必不可少的。
 
ABT的瓊脂糖的有效性、特異性和分選性在目標蛋白純化和分離的實驗過程中獲得結(jié)果的可重復性和可靠性中起到了至關重要的作用。
 
參考文獻:
1. Poirier A, Ormonde JVS, Aubry I, Abidin BM, Feng CH, Martinez-Cordova Z, Hincapie AM, Wu C, Pérez-Quintero LA, Wang CL, Gingras AC, Madrenas J, Tremblay ML. [The induction of SHP-1 degradation by TAOK3 ensures the responsiveness of T cells to TCR stimulation.](https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38166031/)Sci Signal. 2024 Jan 2;17(817):eadg4422. doi: 10.1126/scisignal.adg4422. Epub 2024 Jan 2. PMID: 38166031.
2. Figure 1A. SHP-1–TAOK3 interaction model based on AlphaFold structures and experimentally defined interaction sites. (Fig. 6. From The induction of SHP-1 degradation by TAOK3 ensures the responsiveness of T cells to TCR stimulation)
3. Figure 1B. Model for TAOK3-mediated SHP-1 degradation and regulation of TCR signaling. (Fig. 7. From The induction of SHP-1 degradation by TAOK3 ensures the responsiveness of T cells to TCR stimulation)
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