C2C12細胞培養(yǎng)操作指南
| 名稱 | C2C12 （小鼠成肌細胞） |
| 別稱 | C2c12；C2-C12；C12 |
| 種屬 | 小鼠 |
| 生長特性 | 貼壁細胞 |
| 細胞形態(tài) | 成肌細胞樣 |
| 傳代融合度 | 70% |
| 凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO |
| 推薦傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
細胞簡介
圖片來源：ATCC
推薦培養(yǎng)體系：
DMEM 【VivaCell C3113】＋ 10% FBS 【VivaCell C04002】＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】
細胞培養(yǎng)步驟
待細胞融合度約70%時即可進行傳代。
以T25培養(yǎng)瓶為例：
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吸出原培養(yǎng)液；加入2ml左右PBS【VivaCell C3580】，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞，吸出PBS丟棄；
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加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液【VivaCell C3530】，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞后放入培養(yǎng)箱消化約3 min，顯微鏡下觀察多半呈流沙狀，終止消化；（全程不要拍打培養(yǎng)瓶）
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離心，300g、3min，離心完吸出上清丟棄；
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加入新鮮培養(yǎng)基，將細胞吹到成單個，經(jīng)計數(shù)，均勻接種到新培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)基至5ml，放培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
細胞誘導(dǎo)分化
由于C2C12細胞分化很快，對于研究對理解肌肉細胞發(fā)育和修復(fù)（再生）是非常重要的。低濃度的馬血清能夠有效刺激C2C12成肌細胞向成熟細胞分化。
我們在這里也簡單介紹下誘導(dǎo)分化的相關(guān)知識：
01
誘導(dǎo)體系：
DMEM 【VivaCell C3113】＋ 馬血清 【VivaCell C2510】（常見比例為2%）＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】
02
簡述細胞誘導(dǎo)步驟：
待細胞生長至融合度約過80%時。
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用PBS【VivaCell C3580】潤洗細胞后吸出PBS丟棄；
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換誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基，后續(xù)每24h換液一次，在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長狀況。
03
誘導(dǎo)時刻關(guān)鍵步驟：
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誘導(dǎo)前提：低代次，細胞狀態(tài)很好的C2C12細胞
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融合時間：在其融合率剛過80%，換含有馬血清（一般是2%比例）完全培養(yǎng)液。之后需要每天進行換液
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誘導(dǎo)時間：正常7天內(nèi)可成功
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提示：誘導(dǎo)的期間會有不少的死亡細胞，也有又成肌細胞的緩慢生長，是正常的
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成功的標志：最后可以看見肌管，表現(xiàn)為厚的管狀結(jié)構(gòu)，有時為多核
圖片來源：網(wǎng)絡(luò)，侵刪
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