一.摘要
瘙癢是一種皮膚神經官能癥疾患。臨床上將只有皮膚瘙癢而無原發(fā)性皮膚損害者稱之為瘙癢癥。目前瘙癢的發(fā)病機制尚不確定，現有動物模型多只是反映瘙癢的某些特點，以西醫(yī)指標評判為主。 二.造模動物
現用于制備瘙癢模型的動物有主要有小鼠、大鼠、豚鼠和家兔等，以小鼠、豚鼠更為常用。常選用成年動物，雌雄各半。
三.造模方法
1. 磷酸組胺誘發(fā)制備豚鼠瘙癢模型
1.1 原理 組胺受體是一類G蛋白偶聯受體，通過激活瞬時感受器電位受體，繼而激活一系列的細胞內信號傳導，從而導致瘙癢。
1.2 方法 清潔級豚鼠，體質量250-280g，雌雄各半。實驗前48 h先將豚鼠右后足背剪毛，脫毛劑脫毛，面積約1cm2。實驗當日再將脫毛處皮膚用細砂紙輕輕擦傷，使之發(fā)紅，以滲血但不出血為度。于創(chuàng)傷處涂抹0.05%的磷酸組胺30μL/只（或0.01%的磷酸組胺50μL/只），30min內豚鼠如不出現瘙癢反應（即舔右后足創(chuàng)傷部位的動作），需再涂抹1次組胺，如此重復操作，直至出現為止。記錄涂抹組織胺的次數及累積用量。也可將磷酸組胺換成2%的5-羥色胺10μL，同上法制備豚鼠瘙癢模型。
2. 右旋糖酐誘發(fā)制備小鼠瘙癢模型
2.1 原理 右旋糖酐可誘導機體釋放內源性組織胺，使小鼠產生皮膚瘙癢。
2.2 方法 SPF級昆明種小鼠，18-21g，雌雄各半。小鼠尾靜脈注射0.025%右旋糖酐0.05mL/10g（1.25mg/kg）。以小鼠前爪搔抓頭部、后爪搔抓軀干、嘴咬全身各部位作為瘙癢指征，模型成功。觀察記錄30min內小鼠搔癢次數及搔癢持續(xù)時間。
3.氨基吡啶（4-AP）誘發(fā)制備小鼠瘙癢模型
3.1 原理 4-AP可促機體肥大細胞釋放組胺，導致小鼠發(fā)生瘙癢癥狀。
3.2 方法 小鼠模型：SPF級昆明種小鼠，18-21g，雌雄各半。選擇小鼠背尾部作為注射部位，給小鼠背尾部皮下注射0.02%的4-AP溶液，0.1mL/只。小鼠持續(xù)的舔體后出現停頓計數1次，記錄10min內各小鼠舔體次數。
4. 組胺和4-AP聯用誘發(fā)制備小鼠瘙癢模型
4.1 原理 組胺受體是一類G蛋白偶聯受體，組胺可興奮該受體導致瘙癢發(fā)生；4-AP是一種鉀通道阻滯劑，同時也具有促肥大細胞釋放組胺的作用。
4.2 方法 SPF級昆明種小鼠，體質量18-21g，雌雄各半。小鼠提前1天用脫毛劑脫去頭頸部耳后部分皮膚的毛備用。實驗時，在脫毛部位皮下注射0.05%組胺和0.02%4-AP，每只注射
100μL，注射后立即置透明觀察箱中觀察30min，用數碼攝像機記錄。以小鼠后爪持續(xù)搔抓注射部位至停止記作1次搔抓（連續(xù)搔抓記作1次）。觀察搔抓潛伏期（注射結束至第1次搔抓開始的時間）和30min內搔抓總次數。 四. 瘙癢模型的行為學評價方法
早期，動物瘙癢模型的評價手段還是以人眼觀察為主，通過錄像，然后人工掐秒表去核對抓撓次數和抓撓時間，費時費力，而且準確率不高，為了解決這一痛點，VisuScratch抓撓行為分析軟件基于圖像識別利用AI智能算法，自動檢測動物的抓癢次數和抓癢時間，同時還可以監(jiān)測抓撓的強度，最重要的一點，該套小動物抓癢行為學分析系統可以結合光遺傳或者鈣信號記錄系統等同步實驗，實現了抓癢行為檢測的同時能夠實時監(jiān)測神經元的活動情況。