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C57/BL6 小鼠中的競爭性骨髓移植實驗簡述

瀏覽次數:12054 發布日期:2019-3-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
造血干細胞 (HSC) 能夠分化形成血液系統的全部細胞,是維持血液系統所必需的細胞。造血干細胞是一種多能干細胞,具有自我更新的能力,并能夠通過層次過程生成各種血細胞系統的中期細胞,從而再生成機體血細胞。

為研究干細胞龕,研究人員必須能夠確定在受控條件下細胞群生成成體細胞系統的能力。實驗中采用的典型策略是將富含 HSC 的骨髓移植到受體小鼠血液系統之中,而受體小鼠的血液系統經亞致死劑量照射后人為清除。在這些小鼠中,成體血細胞以及干細胞、前體細胞均將在 照射 2 周后死亡。經過移植的細胞可以分化新的血液系統,從而解救小鼠。HSC 可基于其短期 (ST- HSC)、長期 (LT-HSC) 以及中期 (IT- HSC) 重建能力實現再次分裂 。在大多數報告中,研究人員確定 LT-HSC 的方式是:在移植術后 16-44 周的不同時間點,對其生成循環單核細胞、粒細胞和淋巴細胞的能力進行測定。對移植后細胞進行的第一次競爭性分析應在移植術后 4-6 周予以完成。

在移植研究中,通常采用野生型近交 C57/BL6 小鼠,但前提是:這些小鼠攜帶Ptprcb 白細胞標記
(CD45.2/Ly5.2) 等位基因。Sloan Kettering 研究所 通過回交 SJL 小鼠與野生型 C57/BL6 小鼠的方式,培養出了一種被稱為 C57BL/6-Ly5.1 的同類品系小鼠。這些小鼠攜帶 Ptprcb 白細胞標記 (CD45.1/Ly5.1) 等位基因。使用常用的抗 CD45.1 和 CD45.2抗體,研究人員可以輕松鑒定宿主和移植細胞,并確定 HSC 在競爭性實驗中發揮的作用。

在本文中,我們概括性地描述了一項簡單的實驗,這項實驗的具體內容是:對經照射小鼠進行移植后,對其外周血中Cd45.2- 供體與 CD45.1- 宿主白細胞進行測定。
發布者:貝克曼庫爾特生命科學
聯系電話:400 168 5267
E-mail:apls@beckman.com

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