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非整合型慢病毒——新型基因研究工具

瀏覽次數:3387 發布日期:2012-2-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
非整合型慢病毒——新型基因研究工具
常規慢病毒載體能高效感染分裂細胞和非分裂細胞,將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而實現持久性表達。然而這種隨機整合會帶來插入突變的風險。于是,研究人員也期望用到非整合型的慢病毒包裝系統。

百恩維生物對整合酶蛋白進行突變,推出了整合酶缺陷型的慢病毒包裝系統(非整合型慢病毒)。非整合型慢病毒在目的細胞中產生了環狀附加體,這些載體在分裂細胞中瞬時表達,但在非分裂細胞中穩定表達。與整合型慢病毒相比,非整合型慢病毒導致插入突變的風險大大降低,適合iPS研究、RNA干擾、同源重組等領域。

非整合型慢病毒包裝系統屬于第四代的包裝系統,它將pol基因也分離出來,使gag、pol和env成為三個獨立載體,而不是兩個載體,從而大大降低了產生具有復制能力的病毒的可能性,進一步提高了生物安全性。此系統與其他慢病毒載體配套使用可以制備出高滴度的慢病毒顆粒,無需濃縮即可達到 5x108 IU/ml。之所以能制備高滴度的病毒顆粒,主要有以下三個關鍵因素。

首先,非整合型慢病毒系統中各載體的比例是經過優化的,極大地提高了病毒包裝所需蛋白的表達量。其次,引入了Tet-Off轉錄激活子(tTA),形成病毒包裝蛋白的級聯放大表達效應,極大地提高了病毒包裝蛋白的表達量。第三,百恩維生物擁有轉染效率高極高的轉染試劑,可以高效地轉染Lenti-X 293T包裝細胞系,制備出高滴度的慢病毒顆粒。本系統可以與任何慢病毒表達載體相兼容。

非整合型慢病毒主要優點:
• 高效的基因轉導,不會插入宿主基因組
• 插入突變的風險低
• 采用VSV-G包膜,宿主范圍廣泛
• 分裂細胞中的瞬時表達,非分裂細胞中的穩定表達
• 與任何慢病毒載體配套使用,產生非整合型的慢病毒
• 產生高滴度慢病毒
簡而言之,非整合型慢病毒高表達目的基因,又不會引起突變,是一種非常有效的基因研究工具。
作為病毒包裝領域的佼佼者,百恩維生物還有逆轉錄病毒,是基因研究技術服務的理想選擇。

 
發布者:百恩維生物科技有限公司
聯系電話:0755 26980323 802
E-mail:597817480@qq.com

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