真核細胞通常懸浮在帶有血清和冷凍劑的培養基內，保存在-196°C 的液氮中。如果是商業訂購的，通常儲存在用干冰包裹的凍存管中。所以凍存后的細胞必須快速解凍后立即培養，以獲得最大的生存能力，為了除去凍存時的添加劑， 24 小時后要更換培養基。

一、材料
培養基， 37’C 預熱
培養瓶
裝有70 ％乙醇的燒杯
1ml 、10ml 的移液管、移液器及移液頭

二、步驟
把凍存細胞的管子在37’C 的水浴融化，快速搖動， 1分鐘內使管內的細胞融化。
把融化的管子浸入裝有70 ％乙醇的燒杯內，整個實驗在超凈臺內進行。
小心打開凍存管，不要讓乙醇浸入管內。
將凍存管內的細胞轉移到培養瓶中，并立即加入預熱的培養基。
蓋好培養瓶的蓋子，培養24 小時。
用新培養基替換老培養基。
繼續培養2~3 天或按說明書上的建議進行操作。

三、溫馨提示
1.融解的細胞必須馬上培養，如果來不及培養，就保存在液氮中。
2.細胞通常凍存為1 ml 的體積，加入新的培養基至10ml 。
3.可以在融化了凍存細胞后，把細胞離心下來，并用新鮮的培養基重新懸浮細胞，這種做法只適用于那些對凍存劑敏感的細胞，或者笫二天因為有事不能更換新培養基的情況。