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小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)培養(yǎng)要點

瀏覽次數(shù):1577 發(fā)布日期:2024-11-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
細(xì)胞名稱:小鼠乳腺癌細(xì)胞
細(xì)胞簡稱4T1
產(chǎn)品貨號TCM-C705
種屬來源小鼠
組織來源乳腺
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
生長特性貼壁生長
培養(yǎng)體系RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次
傳代周期:48-72 h
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃

4T1細(xì)胞培養(yǎng)注意要點

1. 小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)細(xì)胞特性

① 小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)為貼壁細(xì)胞,上皮細(xì)胞樣,細(xì)胞在低密度時及傳代第二天會有少量細(xì)胞為圓形或沒有上皮細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞,期間不要換液,一般傳代48h后會恢復(fù)正常。

② 4T1傳代周期較短,在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)體系RPMI-1640+10%FBS中,倍增時間在24h左右,細(xì)胞傳代比例1:6-1:8,傳代周期2-3天。

2. 小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)注意事項

① 4T1細(xì)胞密度越高消化時間越長,建議細(xì)胞密度80%進行傳代,消化時間約5-10min。(不同品牌、不同溫度的胰酶可能消化時間有區(qū)別)

② 4T1細(xì)胞在密度高于80%,或者在同一個培養(yǎng)器皿中培養(yǎng)時間過長,會導(dǎo)致細(xì)胞難消化,推薦使用分步消化的方式進行。

4T1細(xì)胞推薦消化步驟:

a. 去除細(xì)胞上清,使用0.25%胰酶替代PBS清洗一遍;

b. 加入適量胰酶,放入37℃培養(yǎng)箱消化,5min左右取出觀察一次;

c. 如觀察到有大部分細(xì)胞變圓,可輕拍瓶身,如細(xì)胞不可脫落則延長消化時間。

d. 如觀察到有部分細(xì)胞脫落,則將已經(jīng)脫落的細(xì)胞懸液收集到離心管中加入完全培養(yǎng)基中止消化,原瓶中再次加入新鮮胰酶重復(fù)消化一次。

e. 將分次消化的細(xì)胞懸液集中在一起進行離心,去除上清后按照1:6-1:8的比例進行分瓶。

f. 傳代后第二天細(xì)胞不需要換液處理,一般2-3天即可長滿。

③ 血清質(zhì)量差異可能引起倍增時間波動,建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。推薦使用4T1細(xì)胞專用培養(yǎng)基(TCM-G705)。

發(fā)布者:蘇州海星生物科技有限公司
聯(lián)系電話:4009906627
E-mail:hfx@dingbio.com

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