對于制藥或生物醫學相關方向的同學來說，熱源污染即細菌內毒素污染是一個令人頭疼得問題。

本篇本著“熱愛生活，防毒避綠”的原則為各位小主們獻上內毒素檢測指南。
 

假如生活欺騙了你, 內毒素綠了你，不要悲傷, 不要心急! 憂郁的日子里須要鎮靜, 相信吧, 今天獻上的防毒避綠指南將是你綠環陰影下的那縷光~
 

說到內毒素，大家都誰知道，藥典明文又規定，化學藥品的注射劑及原 料藥、疫苗、血液制品以及注射用輔料等，只要涉及到注射、植入，并標榜“無菌、無熱源”的，就得過內毒素檢測（中國藥典9251）的關。當然以上這些大家都知道，不再做贅述。
 

一，那么現行的內毒素檢測方法有哪些呢？

中國藥典 2020 年版中收載了包括家兔、凝膠法、光度法、重組C因子等4大類檢查方法，以及近年來比較受關注的微量凝膠法，下面對各類方法進行了對比：

這么多方法，怎么選呢？選擇困難癥怎么辦？不捉急，瑋馳有lonza的針對各類中國科研小主們需求定制的數套內毒素檢測方案供大家選擇，檢測更靈敏、應用更成熟，直接對號入座吧：

二，動態顯色法：

產品：Kinetic-QCL™ Kinetic Chromogenic LAL Assay （動態顯色法）
•檢測方法一動態檢測顏色變化
•最大靈敏度一0.005EU/mL
•儀器一帶溫控的酶標儀（405nm）

•反應時間一1小時左右，視樣品內毒素限值而定

優勢：
• Lonza最靈敏的內毒素檢測方法

•抗干擾能力強，抵抗各種抑制性分子
•尤其是生物制品如疫苗、抗生素等的理想選擇。

三，動態濁色法：

產品：PYROGENT™-5000 Kinetic Turbidimetric LAL Assay （動態濁度法）

•檢測方法一動態檢測濁度變化

•最大靈敏度一0.01EU/mL

•儀器一帶溫控的酶標儀（340nm）

•反應時間一1小時左右，視樣品內毒素限值而定

優勢：水樣品和大容量注射液體檢測更經濟。

四，凝膠法：

產品:PYROGENT™ Plus Gel Clot LAL Assay （凝膠法）

•檢測方法一肉眼觀察凝膠的形成

•最大靈敏度一0.03EU/mL

•儀器一水浴鍋或金屬浴

,反應時間一1小時

優勢:

•方法簡單，不需要復雜的儀器和軟件

•成本低

Lonza內毒素無論是從均一性，還是從性狀等維度都經過太多的高分文獻的驗證，下面總結了若干條高分文獻以供大家參考使用。

[1] Ong K G, Leland J M, Zeng K, et al. A rapid highly-sensitive endotoxin detection system [J]. Biosens Bioelectron, 2006, 21(12): 2270-2274.

[2] Su W, Ding X. Methods of Endotoxin Detection [J]. J Lab Autom. 2015, 20(4): 354-364.

[3]: 裴宇盛, 蔡彤, 高華. 細菌內毒素檢查新方法進展 [J]. 藥物分析雜志, 2014, 34(3): 392-395.

[4]:裴宇盛, 蔡 彤, 陳 晨, 等. 重組 C 因子法檢測福沙匹坦二葡甲胺中細菌內毒素的方法學研究 [J]. 中國現代應用藥學, 2019, 36(1): 1-4.

[5]:Burkhardt M, LopezAcosta A, Reiter K, et al. Purification of soluble CD14 fusion proteins and use in an electrochemiluminescent assay for lipopolysaccharide binding [J]. Protein Expression Purif, 2007, 51(1): 96-101

[6]:Yeo T Y, Choi J S, Lee B K, et al. Electrochemical endotoxin sensors based on TLR4/MD-2 complexes immobilized on gold electrodes [J]. Biosens Bioelectron, 2011, 28(1): 139-145.

[7]:Hreniak A, Maruszewski K, Rybka J, et al. A luminescence endotoxin biosensor prepared by the sol-gel method [J]. Opt Mater (Amsterdam, Neth) 2004, 26(2): 141-144.

[8]: Pallarola D, Battaglini F. Surfactant-assisted lipopolysaccharide conjugation employing a cyanopyridinium agent and its application to a competitive assay [J]. Anal Chem, 2009, 81(10): 3824-3829.

[9] Priano G, Pallarola D, Battaglini F. Endotoxin detection in a competitive electrochemical assay: synthesis of a
suitable endotoxin conjugate [J]. Anal Biochem, 2007, 362(1): 108-116.

[10] Priano G, Battaglini F. Use of an antimicrobial protein for endotoxin detection in a competitive electrochemical assay [J]. Anal Chem, 2005, 77(15): 4976-4984.

[11] Oliveira M D L, Andrade C A, Correia M T, et al. Impedimetric biosensor based on self-assembled hybrid cystein-gold nanoparticles and CramoLL lectin for bacterial lipopolysaccharide recognition [J]. J Colloid Interface Sci, 2011, 362(1): 194-201.