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電針刺激對抑郁大鼠曠場實驗及水迷宮實驗中的行為影響

瀏覽次數:1621 發布日期:2022-8-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
      有文獻表明,免疫應激、炎癥反應以及細胞因子活化所致的神經炎癥發生是抑郁癥發病的重要因素,物理治療如針灸可通過抑制神經炎癥的產生來達到抗抑郁的作用,而炎性小體NOD 樣受體 3(NOD-like receptor 3,NLRP3)是一種胞質模式識別受體,常結構性表達于小膠質細胞中,可促發一系列免疫炎癥反應,抑制神經發生。大量報道證實,抑制 NLRP3 炎性小體及其信號通路的激活可發揮明顯的抗抑郁作用,本研究以 NLRP3 阻斷劑為對照,探討電針刺激對抑郁癥大鼠學習認知能力的調試作用。

1材料與方法
1.1材料

1.1.1實驗動物

選取32只8周齡SPF級SD雄性大鼠,體重約180~220g。飼養環境:允許大鼠在恒定溫度、濕度和光暗循環(20~25℃;55%±10%;7:00~19:00光照循環)下自由飲水和攝食。

1.1.2主要試劑和儀器

SDZ-ⅡB型華佗牌電子針療儀(蘇州醫療用品廠有限公司,中國),visutrack動物行為分析系統(上海欣軟信息科技有限公司);XR-XZ301 曠場實驗箱,XR-XM101Morris水迷宮(上海欣軟信息科技有限公司)

1.2方法

1.2.1動物分組與造模

將SD大鼠按曠場實驗隨機分為對照組、模型組、NLRP3阻斷劑(MCC950)組、電針(EA)組,每組8只。除對照組外,其余各組皆采用孤養聯合慢性不可預知性溫和應激(CUMS)復制大鼠抑郁模型。應激方法包括:晝夜顛倒12h/12h、4℃冰水浴5min、禁食24h、禁水24h、夾尾1min、潮濕墊料24h、熱板52℃5min,各組大鼠每天采用同1種刺激方式,每種刺激方式使用3~4次,且同種刺激不連續出現。

1.2.2干預治療

在大鼠每天應激后1h,給予NLRP3阻斷劑MCC950和電針組干預治療。MCC950組[9]:將MCC950粉末溶解在無菌生理鹽水中,制成3mg/kg的MCC950溶液,大鼠放置于固定裝置中,用酒精擦拭鼠尾,使用1mL的注射器將MCC950溶液緩慢注射入側尾靜脈,給藥體積為1mL/kg。電針組:參考《實驗針灸學》,選擇“百會”和“印堂”穴,將SD大鼠固定在鼠板上,采用華佗牌針(0.25×13mm)向后平刺4~6mm,針柄處連接華佗牌SDZ-IIB型電子針療儀,電流輸出強度1~2mA,疏密波型,刺激20min,每日1次,連續21d。對照組給予相同時間相同時長的固定。

1.2.3曠場實驗

分別于造模前和治療結束后,進行曠場實驗,將大鼠放入黑色敞箱(100cm×100cm×40cm)角落,觀察4min,記錄各組大鼠后3min內水平運動格子數(四爪皆入記1次)和垂直豎立次數(兩爪騰空放下記1次),以總運動量判斷大鼠自主活動能力。

1.2.4Morris水迷宮實驗

在治療結束后,第1~4天進行定位航行實驗檢測大鼠學習能力,每天將大鼠從4個不同象限面向池壁放入,觀察60s內大鼠爬上平臺的逃避潛伏(Escapelatency,EL)。第5天進行空間探索實驗檢測大鼠記憶能力,移除平臺后大鼠從對立象限放入,記錄90s內大鼠在目標象限的空間探索時間(spaceexplorationtime,SET)。

1.3統計學分析

采用統計軟件SPSS17.0進行統計分析,計量資料以平均值±標準差(±s)表示,組間比較采用單因素方差(One-way-ANOVA)分析,不服從正態分布采用非參數檢驗,P<0.05為具有統計學意義。

2結果

2.1造模前后自主活動變化

曠場實驗結果如圖1所示,造模前各組間大鼠自主活動次數無明顯差異(P>0.05);給藥后,與對照組比較,模型組大鼠活動量明顯下降,電針刺激或藥物干預后,大鼠的自主活動能力明顯增加(P<0.05,P<0.01),有顯著性差異;提示,電針可明顯改善抑郁癥大鼠的抑郁樣行為。


2.2學習記憶能力變化

Morris水迷宮實驗檢測結果如圖2,3所示,給藥結束后前4d進行逃避潛伏期測試,第5天進行空間探索時間測試,與對照組比較,模型組大鼠逃避潛伏期明顯增加,空間探索時間顯著減少;與模型組比較,電針組和NLRP3阻斷劑組大鼠的逃避潛伏期相對減少,空間探索時間有所增加(P<0.05,P<0.01),差異有顯著性;提示,電針應激可以加強抑郁大鼠的學習記憶能力。




3 討論

本研究采用行為學評價系統檢測證實,電針刺激抑郁癥大鼠的百會和印堂穴位可明顯改善其抑郁樣行為,以及學習記憶能力。


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發布者:上海欣軟信息科技有限公司
聯系電話:4008336811/18121054991
E-mail:zhang@softmaze.com

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