淺談鍍膜技術在生物電鏡中的應用
受徠卡顯微系統生命科學應用部的邀請，2020年12月29日北京大學生命科學學院儀器中心電鏡平臺的資深技術工程師，劉軼群老師，在徠卡官方網絡直播平臺講解了鍍膜技術在生物電鏡中的應用。
劉軼群，北京大學生命科學學院儀器中心電鏡平臺資深工程師，主要負責透射電鏡、雙束掃描電鏡及高壓冷凍等設備，在常規透射和掃描樣品制備、基于掃描電鏡三維重構的樣品制備、高壓冷凍、金屬投影以及電鏡三維重構數據處理等方面均積累了一定的經驗。
真空鍍膜是生命科學電鏡制樣中必不可少的技術，比如鍍膜可以增加生物樣品的導電性，保證其在電鏡下更好的觀察；撈在載網上的超薄碳膜可以作為樣品的支撐，在負染、電子斷層成像和冷凍電鏡領域都有著廣泛的應用；定向蒸鍍金屬可以獲得樣品高分辨率的“模型”，是金屬投影、電鏡復型技術的關鍵。
真空鍍膜是生命科學電鏡制樣中必不可少的技術，比如鍍膜可以增加生物樣品的導電性，保證其在電鏡下更好的觀察；撈在載網上的超薄碳膜可以作為樣品的支撐，在負染、電子斷層成像和冷凍電鏡領域都有著廣泛的應用；定向蒸鍍金屬可以獲得樣品高分辨率的“模型”，是金屬投影、電鏡復型技術的關鍵。
劉軼群老師在網絡講堂中按照鍍膜方式的不同類別分別講訴了對應的硬件結構特點，鍍膜影響因素，以及儀器的工作流程。
冷凍斷裂復型和DNA小角度投影可視化鍍膜是生物樣品相對高級和復雜的實驗方法，劉軼群老師結合自己的操作經驗從實驗原理和操作流程上做了詳細的講解。這兩種實驗方法都會用到高真空鍍膜儀的電子束蒸發鍍膜部件，徠卡ACE600和ACE900高真空鍍膜儀都可以選配這種部件。
DNA小角度投影可視化鍍膜實驗方法，可以在常溫透射電鏡下清楚的觀察和區分ssDNA和dsDNA。要想成功完成這類實驗，需要注意DNA取樣和制備過程中的細節步驟，以及在鍍膜過程中設定合適的參數流程。劉老師通過實例圖片講解相關原理和實驗注意事項。
劉軼群老師，對實驗技術勤于鉆研，在透射電鏡、雙束掃描電鏡的操作應用，還有常規和冷凍電鏡制樣技術都有廣泛涉獵，在北京大學生科院電鏡中心這樣的一流科研平臺有條件做到對各種實驗技術的兼收并蓄。
對本次講座內容感興趣的觀眾也可通過E-mail聯系劉軼群老師，郵箱地址是agroupofliu@pku.edu.cn，歡迎大家進行生物電鏡制樣方面的技術交流！
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