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BAC打靶技術大片段人源化小鼠 — TurboKnockout基因編輯

瀏覽次數:925 發布日期:2020-8-10  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負


 

CRISPR/Cas9技術是當前構建基因編輯小鼠的常用技術,但通常情況下,大片段的基因敲入或者人源化小鼠利用CRISPR/Cas9技術構建難度較高。此外CRISPR/Cas9技術可能出現的脫靶效應以及專利糾紛問題會對藥企帶來風險。

 

針對上述問題,賽業生物為您推薦TurboKnockout,TurboKnockout基因編輯技術建立在傳統ES打靶技術之上,基因修飾準確,效果穩定,無脫靶效應,可通過BAC重組實現高達300kb的大片段基因敲入,且通過在ES水平實現多步BAC重組,可大大縮短項目周期,且與CRISPR/Cas9技術相比,TurboKnockout技術無專利糾紛困擾,是涉及新藥研發項目常用的技術。

 

細菌人工染色體(BAC)是低拷貝載體,可容納300kb以上的外源DNA,通過BAC同源重組或定點特異性重組的方式,達到實現用人基因組片段替代相應小鼠基因組片段的目的,是構建人源化小鼠模型的經典策略。

 

 

服務流程

 

Step1 打靶載體設計和構建

Step2 電轉ES篩選陽性細胞

Step3 首建鼠制備

Step4 F1繁殖與篩選

 

 

服務流程

BAC重組可實現300kb大片段基因編輯
由于受DNA克隆載體容量的限制,制作基因修飾動物的外源基因片段通常小于30kb,因此某些調控基因活性的重要元素不可避免地被丟失。BAC可容納300kb以上的外源DNA,通過BAC重組可引入更大的基因及調控序列,從而更接近于內源基因的表達模式。

 

TurboKnockout無脫靶效應
TurboKnockout基因敲除技術建立在傳統ES打靶技術之上,基因修飾準確,效果穩定,無脫靶效應,可勝任難度較高的小鼠基因編輯。

 

無技術專利糾紛
與CRISPR/Cas9技術相比,TurboKnockout技術無專利糾紛困擾,是涉及新藥研發項目常用的技術。

 

周期更短
TurboKnockout基因編輯技術建立在傳統ES打靶技術之上,跨越“嵌合體”階段并自刪除Neo以減少兩代繁育時間,ES打靶快至6個月。同時,TurboKnockout可在ES水平做多步BAC重組,更能縮短實驗周期。

發布者:賽業(蘇州)生物科技有限公司
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