九叔归来3魁蛊婴在线观看_男人躁女人到高潮AV_香港成人论坛_亚洲精品久久久久久偷窥_夜来香成人网_亚洲制服 视频在线观看_无毒黄站_国产传媒18精品A片一区_麻花豆传媒剧国产MV在线观看_东北60岁熟女露脸在线_国产高清视频在线观看97_一道本视频一二三区_yellow免费播放在线观看_浪漫樱花动漫在线观看官网_高清AV熟女一区_天堂在线www_亚洲第一成年人网站_黄色在线免费观看_av女优快播_久久精品99国产精品日本

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 如何溫和地消化細胞減少損失

如何溫和地消化細胞減少損失

瀏覽次數:4445 發布日期:2019-8-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

老子說:治大國如烹小鮮。
網友說:待細胞如養熊貓。

細胞的生命極其脆弱
消化一定程度上是對它們的一種折磨

所以做好細胞消化,
善待你的細胞們

一些細節要注意

在使用胰酶(Trypsins)細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差,做流式時的CD Marker 也可能會下降。

細胞消化心得

對大部分細胞消化來說,可以在消化到差不多快要脫落的時候,移除大部分胰酶,然后直接加新鮮的培養基將細胞吹打下來,省去離心步驟。殘余的胰酶含量很低,所以不會對細胞產生任何影響。
對于難消化的細胞,如HCT15, LS411和KM12,用不含Ca2+,Mg2+的PBS洗滌一次后,加入稍微多一點胰酶,置37ºC徹底消化(一般為幾分鐘)至脫落(一晃細胞就掉下來),然后再加培養基終止胰酶反應、離心 (若是無血清培養基,需改加胰酶抑制劑)。這么做的道理是,細胞消化不徹底,勢必會增加吹打輔助脫落的次數,而吹打次數越多,細胞活性越差。

正確選擇細胞消化試劑
BI提供動物來源的傳統胰酶及基因工程生產的重組胰蛋白酶。

動物胰酶普遍用于血清培養,不同的細胞加入胰酶的成分和濃度不一樣。貼壁不牢和半貼壁細胞盡量使用濃度0.05%不含EDTA的胰酶且不需要放在培養箱孵育,這樣易于控制,對細胞的傷害也降到最低。對于難消化的細胞就需要使用含EDTA的0.25%的胰酶,而不是無限的延長消化時間。

EDTA有什么作用呢?許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA聯合作用。胰酶切割ECM負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca2+,抑制Integrin的貼壁活性,所以EDTA的作用更加溫和。
重組胰酶用于無血清培養。重組胰酶具有與動物源性胰蛋白酶相同的酶學性質,但是不含任何動物源成分,可替代胰蛋白酶使用。
BI生產的重組胰酶Recombinant Trypsin EDTA Solution ,堪稱傳統胰酶的完美替代者。無雜酶,無外源性或內源性病毒污染,無PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制劑,較傳統的胰酶使用方便,在細胞培養實驗中減少了很多不必要的操作,細胞培養效果大大提高了。

                  

BI  Trypsin EDTA Solution A                   BI Recombinant TrypsinEDTA                                Solution 

表格為BI提供的細胞消化相關產品信息,可供選擇參考

·END·


關注微信公眾號
了解更多細胞培養知識

BI中國市場部:上海逍鵬生物科技有限公司
產品咨詢:021-58785545-8006, 18917190011
技術支持:400-820-3979

原文鏈接:閱讀原文

發布者:上海逍鵬生物科技有限公司
聯系電話:021-58785545
E-mail:sales@xpbiomed.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 上饶县| 和林格尔县| 泸水县| 太仆寺旗| 通化市| 龙井市| 垣曲县| 三江| 罗平县| 老河口市| 漳浦县| 乌审旗| 乐东| 华坪县| 乳山市| 松江区| 中西区| 垫江县| 分宜县| 柯坪县| 电白县| 黑龙江省| 昭通市| 仙居县| 安顺市| 桦川县| 甘洛县| 河津市| 泸溪县| 游戏| 神农架林区| 南康市| 聂拉木县| 建德市| 深圳市| 贵德县| 巴彦淖尔市| 那坡县| 阿合奇县| 合肥市| 中方县|