​有效、可靠的評估植物細胞活性，尤其是花粉活性，對于育種研究和農業生產來說是非常重要的環節。目前花粉活力研究的傳統方法，如染色法和體外萌發法，均存在可靠性差、分析速度慢、有物種依賴性等諸多不足。在過去的幾十年中，基于細胞介電特性分析單細胞狀態的微流控阻抗流式細胞儀（IFC）已逐漸成為微生物學和醫學上的常規檢測方法，而本文研究旨在證明IFC法在花粉活力分析中的潛能。

本文的研究中，Heidmann I等同步利用微流控阻抗流式細胞法、傳統染色法、滅活對照法、花粉萌發測定法測量了不同發育階段、不同熱處理下的花粉活力、發育狀態及萌發能力，并將IFC法測量結果與染色法和萌發法測量結果進行相關性分析。結果表明，IFC法可以快速檢測并量化花粉發育階段、失活或活性狀態，且與傳統FDA染色法測量結果有很高的相關性。此外，IFC法還可以將具有活躍萌發潛力的花粉從失活和有活力但未萌發的類群中區分出來。

圖1. 煙草花粉發育階段分析

采集不同生長階段的煙草花蕾（花芽）分別用染色法（DAPI）、淀粉積累法（盧戈爾液）以及IFC法（0.5和12MHz）測定花粉的發育階段。上圖所示花粉發育階段（I-VIII）分別為，I：四分體時期；II：單核時期；III：晚期單核時期；VI-VII：雙核時期；VIII：成熟花粉粒。

圖2. IFC法區分活性及失活花粉

分別用IFC法和FDA染色法測量了黃瓜（綠色），甜椒（藍色）和番茄（紅色）的花粉活性，并進行了熱處理對比分析以及加熱滅活對照。A：新鮮的番茄花粉（左）和熱滅活后的番茄花粉（右）；B：花粉活力隨溫度的變化（IFC法，*p ≤ 0.05）；C：IFC法與FDA染色法相關性分析

圖3. 檢測熱處理花粉的狀態（萌發法及IFC法）

A：萌發法檢測新鮮花粉和熱處理后的花粉萌發狀態，黃瓜（綠色），甜椒（藍色）和番茄（紅色），*p = <0.05；B：IFC法檢測不同狀態的花粉，新鮮花粉（左），40℃熱處理后的花粉（中），混合花粉（右）；C：IFC法與萌發法檢測結果的對比，IFC法（紅），萌發法（紫）

本文的研究表明，IFC法是一種無物種依賴性的省時省力、高效可靠且非破壞性的花粉質量檢測方法。

Heidmann I, Schade-Kampmann G, Lambalk J, et al. Impedance flow cytometry: a novel technique in pollen analysis. PloS one, 2016, 11(11): e0165531.