魚緊密連接蛋白檢測試劑盒范圍及實驗原理方法
魚緊密連接蛋白檢測范圍及實驗原理方法
魚緊密連接蛋白(Occludin)ELISA檢測試劑盒
說明
由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產品可能存在一定的質量技術風險。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被魚緊密連接蛋白（Occludin）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的魚緊密連接蛋白（Occludin）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
操作步驟
魚緊密連接蛋白(Occludin)ELISA檢測試劑盒
英文名稱：Fish Occludin ELISA Kit
實驗類型：夾心法
檢測范圍：0.625 ng/mL – 20 ng/mL
最低檢測限：最低檢測濃度小于0.1 ng/mL
應用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體（本產品僅供實驗室科研及非臨床用途）
實驗類型：夾心法
檢測范圍：0.625 ng/mL – 20 ng/mL
最低檢測限：最低檢測濃度小于0.1 ng/mL
應用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體（本產品僅供實驗室科研及非臨床用途）
由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產品可能存在一定的質量技術風險。
- 最終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，請務必準備充足的標本備份。
- 不同批次的同一產品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據試劑盒內說明書進行實驗操作，網站電子版說明書僅作參考。
- 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結果。
- 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
- 使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。
- 若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
- 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被魚緊密連接蛋白（Occludin）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的魚緊密連接蛋白（Occludin）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
操作步驟
- 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
- 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
- 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
- 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
- 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
- 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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