水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒
一、簡介
水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒適合于快速從水生動物組織勻漿液中提取高純度的病害基因組核酸。試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù)，提取過程中無需使用有毒的酚氯仿抽提，也無需進行耗時的醇類沉淀，獲得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern雜交/Northern雜交、以及LAMP/RT-LAMP等系列下游實驗。 
二、原理
    本試劑盒采用的硅膠柱以高結(jié)合力的玻璃纖維濾膜為基質(zhì)。濾膜在高濃度離子化劑(如鹽酸胍或異硫氰酸胍)條件下，可通過氫鍵和靜電等物理化學(xué)作用吸附核酸，而蛋白質(zhì)和其它雜質(zhì)則不被吸附而去除。吸附了核酸的濾膜經(jīng)洗滌去除殘留的蛋白質(zhì)和鹽，最后可以用DEPC處理水洗脫濾膜上吸附的核酸，得到的核酸純度高，可直接用于各種下游實驗。
水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒基于硅膠柱純化方式。樣品在裂解液中裂解，核酸釋放到裂解液中。在高鹽的環(huán)境下通過硅膠柱，核酸被吸附在硅膠柱的膜上，而蛋白質(zhì)則不被吸附而去除。后經(jīng)洗滌液洗滌去除鹽分，最后核酸被無核酸酶洗脫液洗脫。
三、組成
                   071011M

組分    含量
管A    48個
管B    48個
裂解液    30ml
洗滌液    10ml
洗脫液    36ml
說明書    1份
注意：洗滌液在初次使用前加入40ml無水乙醇，并于室溫保存。

四、保質(zhì)期
水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒組份可在室溫下（15-25℃）干燥保存12個月。長期保存時需置于2-8℃。

五、需要準備的材料和工具
無菌生理鹽水
無水乙醇
潔凈的鑷子和剪刀
勻漿機、均質(zhì)袋或一次性研磨棒
微量移液器（100-1000μl，10-100μl）
無DNase和RNase的滅菌離心管（1.5ml或2ml）
無DNase和RNase的滅菌Tip頭
渦旋振蕩器
離心機（轉(zhuǎn)速≥10,000rpm）

六、從水生動物病害中快速提取DNA/RNA的方法
該方案采用離心操作，適合于快速從水生動物組織樣品中提取病害基因組DNA/RNA。以下步驟都在室溫下進行。
1．取適量待檢新鮮樣品組織加入1~5倍體積的生理鹽水進行勻漿。
2．取200μl勻漿液至1.5ml離心管中，加入500μl裂解液至上清液中，顛倒混勻，靜置5 min裂解病害，離心3 min。
3．把管 A裝在2ml管B中，吸取400μl至管A中，向管A中加入200μl無水乙醇，渦旋混勻20秒。
4．10,000 rpm離心1min。
5．倒棄管B中的濾液，把管 A裝回管B中，加入600 μl洗滌液至管 A中，10,000 rpm離心1min。
6．倒棄管B中的濾液，把管 A裝回管B中，10,000rpm離心2 min。
7．把管 A裝在新的1.5ml離心管中。加入50μl洗脫液至管 A中，靜置1-2min，10,000rpm離心1min，所得溶液即為病害基因組核酸溶液。若暫時不用，于-80℃儲存。

七、常見問題解答
該列表可能有利于您解決在提取過程中所碰到的問題。若您對試劑盒存在疑問或有良好的建議，又或者您在分子生物學(xué)實驗中碰到問題，都請您聯(lián)系我們。我們將竭盡所能為您排擾解難。

現(xiàn) 象    原 因    解 決 方 法
核酸產(chǎn)量低或無    樣品被反復(fù)解凍    避免反復(fù)凍融樣品。推薦使用新鮮樣品或只解凍過一次的樣品。
    樣品中病害滴度太低    用小量濃縮柱濃縮病害樣品或提高樣品的用量。
    樣品勻漿不充分或裂解不充分    充分勻漿樣品，適當延長裂解時間。
    洗滌液沒有加入乙醇稀釋    初次使用前，洗滌液必須加入無水乙醇進行稀釋
核酸下游應(yīng)用結(jié)果
不理想    核酸濃度太低    減少洗脫時DEPC水的用量以提高核酸的濃度。
    核酸產(chǎn)量太低或無    參見上面
    乙醇污染    確保按照說明書中的條件進行操作，如空柱離心時速度確保大于等于10,000rpm，離心時間為1min。
若以上的解答還是無法解決您的問題，請您聯(lián)系我們。