ABGENT抗體是通過什么動物來制備的？我們的單克隆抗體大多是通過BALB/c小鼠制備的，多克隆抗體大多是通過新西蘭兔制備的。客戶抗體定制服務(wù)也主要是使用這兩種動物

Western Blot檢測中你們是如何區(qū)分特異性目標條帶的？

多克隆抗體的Western Blot檢測結(jié)果通常會出現(xiàn)多條帶，我們通過對免疫后血清和免疫前血清的檢測結(jié)果進行比較：在抗體和免疫后血清中都出現(xiàn)而免疫前血清中未出現(xiàn)，且符合預(yù)測分子量的條帶，就可以認為是特異性的目標條帶。

為什么我買的抗體Western Blot檢測沒有陽性結(jié)果？

在ABGENT的Western Blot實驗流程中有一些細節(jié)是避免背景深和沒有結(jié)果的關(guān)鍵。

① 不要過度清洗膜，膜的清洗使用含有0.1% Tween-20的TBS，3次，每次5分鐘即可。過度的清洗可能會把一抗洗掉。合適的清洗條件能夠很好的消除背景并得到最好的結(jié)果。

② 不要過長時間的封閉。過度的封閉會導(dǎo)致信號減弱。

③ 請確認您所要檢測的抗原是否是產(chǎn)品說明書上所列舉的抗原種屬。

怎樣才能保證Western Blot實驗的可重復(fù)性？

造成Wester Blot實驗重復(fù)性差的因素很多，可以從以下幾個方面考慮：

① 抗體的保存條件是否嚴格；

② 抗體稀釋后工作濃度很低不能反復(fù)使用；

③ 檢測樣品是否含有目標蛋白？細胞裂解液中的目標蛋白含量會因細胞數(shù)