Thorlabs多光子顯微鏡基本套件及應用

瀏覽次數：5596　發布日期：2012-8-2　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

MPM-2PKIT多光子基本套件是Thorlabs公司為想要自己搭建多光子成像系統的研究人員提供的解決方案，在量身定制的同時又不犧牲成像的性能。該套件包含一個模塊化多光子成像系統所必須的核心部件，為特定應用而配置。此外，該系統無需傳統顯微鏡，即可以對大樣品，如整個活體生物等進行成像，并且該設計減小了其在工作臺上占據的體積。

MPM-2PKIT 基本套件是由MPM200-2多光子成像系統衍生而來的，但該套件以組件形式存在。該套件包含一個掃描頭、一個近紅外（NIR）掃描和套筒透鏡配件、一個初級分色鏡模塊、一個作為二次分色和發射濾光的濾光片模塊、兩個高靈敏度GaAsP光電倍增管和圖像采集電路及軟件。多光子顯微鏡基本套件的外觀如圖1所示。

圖1 多光子顯微鏡基本套件

本系統的光路圖如圖2所示

圖2 多光子顯微鏡套件光路圖

多光子顯微鏡系統在生物學領域的一個成功實例是活體細胞成像。多光子顯微技術非常適合于樣品需要長時間成像的活體細胞研究。其高速掃描特性減少了在活體細胞成像過程中的光漂白效應，這對于細胞成像是很有利的。Thorlabs公司的多光子系統通過一個掃描振鏡對實現高速掃描。該系統還采用近紅外雙光子激發效應，促進了樣品的深度滲透，將光漂白效應最小化，與單光子激發技術相比降低了光學毒性。多光子顯微技術已經成功用于追蹤GFP標記的細胞和細胞結構，如C.Elegens線蟲中的G蛋白受體，見圖3。

圖3 C.Elegens線蟲中的G蛋白受體成像

實時活體腎血流動的灌注檢測也是一個例子，兩個通道使用一個Olympus 20X 1.0 NA物鏡以30幀/秒（512*512分辨率）同時進行圖像采集。血液與葡萄糖（血漿，綠色）和1微米熒光微球的混合物一起灌注。在血管中我們追蹤兩個獨立的微球（A和B）。后續幀之間的高瞬時分辨率保證了各微球更精確的速度測量。在綠色的血漿之中我們還可以觀察到一些暗色物體，這些暗色物體是紅細胞，這樣就為血液流動分析提供了額外的依據。