兩款熒光顯微鏡的使用心得
作者：符薇，復旦大學生物醫學研究院
說到生物，大家就會想到一個一個形態各異的細胞。但是要觀察細胞形態的細微變化，一架性價比高的顯微鏡是必不可少的。 從列文虎克發明第一架光學顯微鏡至今，顯微鏡為了滿足觀察者的需要而不斷更新換代。目前，生物細胞培養最常用的就是熒光顯微鏡，可以用于觀察綠色，紅色和藍色三種熒光。 另外，從觀察活細胞角度和固定細胞角度，又可以分為倒置顯微鏡和正置顯微鏡兩種。
先說說奧林巴斯的熒光顯微鏡，我使用的機器型號是OLYMPUS BX51（圖片來自網絡）。
之所以很多人選擇奧林巴斯的熒光顯微鏡，很大程度上是因為他們家的軟件設計的相當人性化。這款軟件功能非常強大，從圖像拍攝到圖像后處理一步到位，可以滿足你所能想到和想不到的多種拍攝細節要求。在圖像獲取方面，該軟件的活圖采集像素比較高，而且清晰度也很不錯，另外還配有圖像鎖定按鈕，很方便將觀察區域進行鎖定，方便多張相片的采集。在準備拍攝的時候，首先要做好照片的白平衡，這個對任何拍攝都十分重要。奧林巴斯的熒光顯微鏡設計了兩種白平衡調節模式，在白光模式下，以1cm左右的正方形聚焦框為中心，選擇周邊一鍵接觸式（one touch）或者周邊區塊選擇模式，都可以很容易的完成白平衡的設置。在熒光模式下，則聚焦框需要縮小到熒光區域，然后才可以進行白平衡校正。另外，他家的鏡頭也相當清晰，還配有活圖拍攝模式，支持一段時間的動畫拍攝，只要設好拍攝時間范圍，配上培養盒就可以實現活細胞的動態拍攝。在圖像處理方面，功能也比較齊全，可以加注標尺，也可以實現多色圖片的重疊效果制作，而且界面非常友好，對photoshop不太熟悉的拍攝者，如果有了這個軟件，一定會覺得方便很多。據說奧林巴斯的熒光顯微鏡軟件在前幾年銷量非常好，但近幾年受到盜版的影響，銷售量迅速下滑。畢竟這套價值數萬的軟件，除了功能強大外，售價也相當不菲，很多銷售代理奧林巴斯的熒光顯微鏡的公司為了降低成本，也常常給客戶安裝盜版的軟件，才影響了該軟件的銷售量。 說了那么多優點，奧林巴斯的熒光顯微鏡的缺點究竟是什么呢？我覺得是40倍以上圖像的清晰度問題，因為超過20倍以上的物鏡，其觀察的清晰度就會受到影響。雖然他家也提供鏡頭切換模式，但效果改善不太明顯。不過如果大家不介意試試油鏡的話，奧林巴斯的熒光顯微鏡提供了100倍物鏡，在滴上油后的拍攝效果可以令大家滿意，甚至于細胞內的小型細胞器和轉染產生的熒光小顆粒有時都可以觀察得非常清楚，可以為文章發表提供很好的證據支持。
另一個要說的就是最近我們才添置的Leica熒光顯微鏡，型號為Leica DMI 300B（圖片來自網絡）。
說實話，我是在最近使用中才了解這個德國牌子的產品，產品的外觀感覺還是不錯的。據他們工程師說，他們的鏡頭性價比是比較高的，在使用中我也覺得他家的鏡頭清晰度可以算是中低價位產品中的佼佼者。而且對于那些經費不是很充分的實驗室，買一個倒置顯微鏡，也可以同時要求工程師幫忙做一下小的改裝，就可以作為一臺正倒置兩用機器，也不失是一種不錯的選擇。但是有一個致命的弱點，就是他家的軟件，超級的不好用。雖然提供中英文兩種界面，但有很多缺點，首先白平衡的調節比較粗糙，另外不支持動態動畫的拍攝，還有就是活圖的捕捉像素過低，常常造成圖片顯現遲緩和焦距對不準的現象。在圖像的后續處理，也功能超少，必須借助photoshop等其他軟件的幫助，所以我只能說Leica熒光顯微鏡是一臺軟硬件相當不匹配的設備，我個人非常的不推薦他家的軟件。如果要裝一個奧林巴斯的軟件，他家的工程師收費比較高，個人覺得有點坑人。
眼睛是心靈的窗戶，而顯微鏡則是生物工作者的靈魂馬車，可以幫助我們通往更多神秘未知的生物領域。我們不僅要懂得選擇，還要懂得如何去駕馭這座馬車，才能達到事半功倍的效果。好的鏡頭加上好的軟件，才是兩股有力的韁繩，缺一不可。如何DIY一臺性價比高的顯微觀察設備，我的建議是貨比三家，綜合考慮，從成本到效益多方考慮，再作出一個符合自身定位的決定。
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