RT-PCR及質(zhì)粒載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)

服務(wù)內(nèi)容：
1、RT-PCR獲取目的基因，并構(gòu)建到目的載體上；
2、半定量RT-PCR；

[發(fā)表評(píng)論] [本類其他服務(wù)] [本類其他服務(wù)商]

具體操作：

一、RT-PCR擴(kuò)增目的基因：

1、提取目的細(xì)胞或組織的總RNA，并將其反轉(zhuǎn)錄成cDNA；

2、采用普通PCR擴(kuò)增得到目的基因（對(duì)于片段較長(zhǎng)或在細(xì)胞中表達(dá)量較低的基因，采用巢式PCR進(jìn)行擴(kuò)增）；

3、將目的基因克隆到T載體上，并進(jìn)行測(cè)序鑒定（如客戶需要克隆到其他載體上，需要提供載體，可直接將目的基因克隆到相應(yīng)載體上）；

二、半定量RT-PCR（一般用于目的基因表達(dá)改變的檢測(cè)）：

1、提取目的細(xì)胞或組織的總RNA，并將其反轉(zhuǎn)錄成cDNA；

2、采用普通PCR擴(kuò)增內(nèi)參（b-actin或GAPDH），調(diào)整擴(kuò)增循環(huán)數(shù)，使其處于對(duì)數(shù)擴(kuò)增期；調(diào)整內(nèi)參，使其保持一致；

3、普通PCR擴(kuò)增目的基因，并通過(guò)圖像分析軟件分析目的基因與內(nèi)參表達(dá)量的比例；

4、統(tǒng)計(jì)分析；

客戶須知：

1、提供的引物必需保證特異性或委托本公司設(shè)計(jì)；

2、對(duì)于樣品量較多的半定量RT-PCR，建議進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)；

服務(wù)價(jià)格：

詢價(jià)。

售后服務(wù)

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