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病毒載體具有易制備、純化、濃縮，宿主范圍廣，感染率高，不整合宿主基因組，遺傳毒性和免疫毒性低等優勢，是目前最好的RNA干擾技術之一
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| 服務商： 北京凱諾春天生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務 >> |
論支持：
目前，siRNA常用的構建方法包括化學合成、體外轉錄、制備表達siRNA的質粒或病毒載體等。
質粒載體由于其質量可控性好，帶有篩選標記，可持續抑制靶基因表達等優勢，適用于一個已知有效的siRNA序列，建立能夠較長時間維持基因沉默的細胞系，方便進行進一步研究。
病毒載體具有易制備、純化、濃縮，宿主范圍廣，感染率高，不整合宿主基因組，遺傳毒性和免疫毒性低等優勢，是目前最好的RNA干擾技術之一。適用于轉染效率低、維持較短時間的基因沉默的siRNA。
服務內容：
1、表達siRNA的質粒載體的構建；
2、表達siRNA的腺病毒載體的構建；
具體操作：
1、明確需要干擾的目標基因，確定有效的干涉序列：
（1）交由專業公司進行設計和篩選；
（2）交由專業公司設計并合成siRNA，轉染細胞后，檢測目的基因的表達，篩選得到有效的干涉序列；
2、目的細胞轉染攜帶報告基因的質粒載體或感染攜帶報告基因的重組腺病毒，采用流式細胞檢測其轉染效率；并根據實驗結果確定構建何種載體；
3、質粒載體的構建：根據siRNA序列設計相應的shRNA序列，合成雙鏈shRNA，將其克隆到H1啟動子下游；如需要同時表達報告基因，可在干涉序列下游通過IRES連接報告基因（如EGFP、RFP等）；對載體進行測序鑒定；
4、將質粒載體轉染特定細胞后，根據抗性進行篩選得到穩定表達干涉序列的細胞，用于下一步研究；
5、腺病毒載體的構建：對于質粒轉染效率較低的細胞，可選用腺病毒載體，具體操作見腺病毒制備技術服務內容；
客戶須知：
1、本公司負責siRNA序列篩選、載體構建及后續實驗，siRNA序列的合成將委托專業公司進行；
2、客戶提供目的細胞，需要保證其狀態良好并提供細胞的詳細信息；
服務價格：
詢價
流式細胞技術服務
可以提供的服務：
1. 細胞表面分子的檢測。
2. 細胞凋亡檢測。
細胞周期檢測
手機版：shRNA表達載體構建技術服務
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