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細胞凋亡技術服務
利用熒光素標記的Annexin-V作為熒光探針,流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生
服務類別:分子與細胞總訪問:1176
最后更新:2010-4-8半年訪問:11
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理論支持:
細胞凋亡早期,位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸可翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中;Annexin-V是Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與PS高親和力特異性結合。利用熒光素標記的Annexin-V作為熒光探針,流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。
碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和死細胞,PI能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。將Annexin-V與PI匹配使用,可將凋亡早晚期的細胞以及死細胞區分開。
服務內容:
1、檢測藥物(包括化學藥物、基因藥物等)對細胞凋亡的影響;
2、檢測各種干預手段(通路抑制劑、干涉載體等)對細胞凋亡的影響;
具體操作:
1、將細胞進行藥物或其他干預方式進行處理,設立陰性對照和陽性對照組;
2、根據需要培養一定時間后,收集細胞(貼壁細胞用胰酶消化),用PBS洗滌兩次(細胞數量需大于2×105);
3、加入100ul Binding Buffer和FITC標記的Annexin-V(20ug/ml)10ul,室溫避光30min;
4、加入PI(50ug/ml)5ul,避光反應5min后,加入400ul Binding Buffer,立即用FACScan進行流式細胞術定量檢測;
客戶須知:
    1、細胞本身狀態對結果影響大,因此客戶提供的細胞必須保證狀態;
2、建議客戶同時提供陽性對照藥物(樣本)和陰性對照藥物(樣本);
服務價格:

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