|
熒光定量PCR檢測技術服務：從RNA提取到反轉錄再到熒光定量。
|
|||||||||||||||||
| [發表評論] [本類其他服務] [本類其他服務商] | ||||||||||||||||||
| 服務商： 北京凱諾春天生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務 >> |
技術服務詳細描述
Real Time PCR法，也就是實時熒光定量檢測PCR擴增量的方法。因其無需電泳，且具有快速性及定量性而倍受青睞。 本公司承接利用Real Time PCR法進行課題研究的技術服務，可從引物設計合成開始，至Real Time PCR反應檢測的一條龍技術服務，歡迎惠顧！
------------------------------------------------------------------
【服務項目】
定性分析 絕對定量 相對定量（mRNA表達量分析） DNA Microarray數據確認 RNAi效果確認（siRNA的篩選）------------------------------------------------------------------
【檢測方法】
熒光染料嵌合法（SmartGreen） TaqMan探針法
【服務內容】
以相對定量為例。
引物設計（免費）、合成（客戶自費） 制作標準曲線。使用設計合成的引物，以客戶提供的Total RNA樣品為模板，進行Real Time PCR反應，確認引物模板的反應性能。然后將模板進行5個濃度梯度稀釋，制作標準曲線，以供進一步定量分析使用。 Real Time PCR反應及定量分析 對客戶提供的RNA Sample，進行Real Time RT-PCR反應，并進行定量分析。用相對定量方法進行定量分析時，如客戶需要，可對管家基因等參比基因進行同樣操作，用所得到的值進行RNA量的校正，最后求得目的基因的相對表達量。------------------------------------------------------------------
【服務項目說明】
定性分析PCR反應結束后的PCR產物無需電泳檢測，可以通過Real Time PCR方法，簡單快速地對目的基因進行高特異性、高靈敏度的檢測，同時閉管操作的實時檢測可以有效防止反應產物的污染。本技術可以廣泛應用于病毒、病原菌等致病微生物的檢測以及各種生物品種的鑒定等。
絕對定量絕對定量首先必須構建與檢測樣品目的基因具有相同序列的標準品。使用已知濃度的標準品制作3個點以上的標準曲線后，可以使用標準曲線對未知濃度的檢測樣品進行絕對量（起始拷貝數）分析。
相對定量（mRNA表達量分析）基因表達的研究一般采用相對定量的方法。相對定量法必須對樣品的目的基因和參比基因內標同時分別進行定量，然后求出對于參比基因的目的基因的相對量。通過對樣品間的目的基因的相對量進行比較，可以對不同樣品間的mRNA進行表達量分析。參比基因通常選用表達量相對恒定的House Keeping Gene，如：GAPDH、b-actin等。通過同時對參比基因的實時檢測，可以對樣品之間由于起始細胞數不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量誤差進行校正，達到在嚴格意義上對樣品之間的mRNA表達量進行分析之目的。
------------------------------------------------------------------
【樣品要求】
進行mRNA表達量分析時，請寄送足量的并且保證純度的Total RNA（濃度在100 ng/ml以上，體積在20ul以上)。如果目的基因表達量低時，應盡量提供更高濃度的Total RNA。 如果提供的材料為細胞或組織，DNA、RNA的提取費用另收。同時應保證材料新鮮，動物細胞數為106以上，動植物組織為50mg以上。------------------------------------------------------------------
【服務價格】
以下技術服務價格是針對Human、Mouse、Rat等三個生物物種采用染料嵌合熒光（SmartGreen）法的報價。如果是三種生物種以外的物種或采用TaqMan探針方法時，價格請具體垂詢! 以下技術服務報價是以提純的核酸（即DNA或RNA）為起始材料設定的，如果需要進行核酸純化時，費用另計。進行mRNA表達量分析，如果提供的total RNA量少或目的基因表達量低，Total RNA不能作為標準品使用時，此時需客戶自行制備標準品。 以下技術服務報價為1個目的基因的報價。同一材料的N個目的基因的價格=1個目的基因價格×N × 0.75。 如因實驗材料等非本公司原因造成某實驗步驟失敗，使實驗提前終止，已啟動的實驗項目仍正常收費。手機版：熒光定量PCR檢測技術服務
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com