抗體標記主要是用于抗原的定位分析，在某些情況下，也可以對混雜有大量其他分子的樣本中的抗原進行定量檢測。由于抗體與其相應抗原具有很高的親和力，因此帶有易識別標記物的抗體可以定位分析抗原，并且是一種理想的快速價廉的定量測定方法。
 
那么常見的抗體標記方法有哪些呢？
和所有蛋白質一樣，抗體也是由氨基酸組成的。理論上，通過大多數氨基酸可以實現生物偶聯。以下內容介紹了幾種基于賴氨酸殘基的抗體偶聯和標記技術。
 
①NHS（琥珀酰亞胺）酯法
應用廣泛的熒光染料（如羅丹明衍生物）是采用這種方法對抗體進行偶聯。通常在磷酸鹽緩沖液中進行，隨后與未標記的染料在柱上進行分離。該方法的主要缺點是，由于酯類對水分敏感，酯類的穩定性差。因此，反應結束后，標記抗體應立即使用。
 
②吉妥珠單抗（Gemtuzumab ozogamicin, Mylotarg®）是全球范圍內首個獲批上市的抗體偶聯藥物（ADC）。半合成的卡奇霉素衍生物具有NHS酯，以便將卡奇霉素與人源化IgG4的賴氨酸殘基偶聯。然而，由于患者的臨床獲益不足，Mylotarg®已于2010年退市。
 
③異硫氰酸鹽法
這種方法主要用于異硫氰酸熒光素（FITC）染料的偶聯，廣泛用于熒光標記蛋白和抗體的制備。異硫氰酸鹽比NHS更穩定，但也更難制備，而且利用該方法，標記的反應效率可能會降低。與NHS法一樣，應在反應結束后通過層析法去除多余染料。
 
④碳二亞胺法
碳二亞胺衍生化合物將蛋白質上的羧基轉換為反應中間體，可與賴氨酸發生反應。碳二亞胺的高反應性意味著它們可用于使用相對惰性的材料（如磁性或金顆粒）標記抗體。最常用的碳二亞胺為EDC。NHS有時可被添加至反應中，以輔助產生相對穩定的中間體。
 
該方法操作簡單，但與NHS一樣，EDS具有吸水性，因此，標記后抗體需立即使用。
 
⑤高碘酸鹽法
這種方法可用于制備特異性的HRP標記抗體。高碘酸鹽通過產生與賴氨酸殘基相互作用的醛分子來激活HRP。HRP本身只有少量的賴氨酸殘基，因此酶聚合的影響不大。HRP和抗體之間的鍵是可逆的，可通過添加氰基硼氫化鈉使其保持穩定。
 
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