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Bio-RadPCR儀售后維修電話【Biorad總部】
【伯樂-售后】Bio-Radpcr儀后維修電話4008-090039.
服務(wù)類別:儀器維修總訪問:435
最后更新:2025-2-20半年訪問:3
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【北京總部】Bio-Rad 售后服務(wù)熱線:4008-090039.

MyCycler 是一款 96 孔高性價(jià)比 PCR 儀。它配備有12 厘米(4 .7") 高分辨率顯示屏,用戶可以容易而快速的進(jìn)行程序編寫。人性化的菜單可以幫助用戶以最快的速度完成反應(yīng)的各項(xiàng)設(shè)置。其具體性能如下:

?  96 孔反應(yīng)模塊,專為0 .2ml 的 PCR 反應(yīng)管或反應(yīng)板而設(shè)計(jì)

?   直觀的程序編寫設(shè)置,包括溫度、時(shí)間和程序等

?   用戶可設(shè)置休眠模式使其更節(jié)電

?   儀器每次運(yùn)行情況會(huì)保存在運(yùn)行報(bào)告和校正報(bào)告中

?   自動(dòng)調(diào)節(jié)式熱蓋適合于各種標(biāo)準(zhǔn)的 0 .2ml PCR 反應(yīng)管,條管和反應(yīng)板

?   可選擇進(jìn)行梯度 PCR 功能升級(jí),可以同時(shí)在8個(gè)不同溫度條件下孵育,以便在一次實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件

基本的PCR須具備 
1.要被復(fù)制的DNA模板 Template
2.界定復(fù)制范圍兩端的引物Primers.
3.DNA聚合酶Taq. Polymearse
4.合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水。

工作原理
利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈,進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。

反應(yīng)步驟
分別是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所謂 Denaturing乃是將DNA加熱(至90~95℃)變性, 將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板. 而Annealing 則是令 Primers于一定的溫度下(冷卻至55~60℃)附著于模板DNA兩端。 最后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加熱至70~75℃)進(jìn)行引物的延長 Extension of primers及另一股的合成。
PCR的最早設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史,二十世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù),Korana于1971年最早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想:“經(jīng)過DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復(fù)該過程便可tRNA基因”。
實(shí)現(xiàn)
1985年美國PE-Cetus公司人類遺傳研究室的Mullis 等發(fā)明了具有劃時(shí)代意義的聚合酶鏈反應(yīng)。其原理類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制,只是改進(jìn)與完善Mullis最初使用的DNA聚合酶是大腸桿菌 DNA 聚合酶 I 的Klenow片段,其缺點(diǎn)是:
①Klenow酶不耐高溫, 90℃會(huì)變性失活,每次循環(huán)都要重新加。
②引物鏈延伸反應(yīng)在37℃下進(jìn)行,容易發(fā)生模板和引物之間的堿基錯(cuò)配,其PCR產(chǎn)物特異性較差,合成的DNA片段不均一。此種以Klenow酶催化的PCR技術(shù)雖較傳統(tǒng)的基因擴(kuò)增具備許多突出的優(yōu)點(diǎn),但由于Klenow酶不耐熱,在DNA模板進(jìn)行熱變性時(shí),會(huì)導(dǎo)致此酶鈍化,每加入一次酶只能完成一個(gè)擴(kuò)增反應(yīng)周期,給PCR技術(shù)操作程序添了不少困難。這使得PCR技術(shù)在一段時(shí)間內(nèi)沒能引起生物醫(yī)學(xué)界的足夠重視。

1988年初,Keohanog改用T4 DNA聚合酶進(jìn)行PCR,其擴(kuò)增的DNA片段很均一,真實(shí)性也較高,只有所期望的一種DNA片段。但每循環(huán)一次,仍需加入新酶。

1988年Saiki 等從溫泉中分離的一株水生嗜熱桿菌thermus aquaticus 中提取到一種耐熱DNA聚合酶。 此酶具有以下特點(diǎn):
①耐高溫,在70℃下反應(yīng)2h后其殘留活性大于原來的90%,在93℃下反應(yīng)2h后其殘留活性是原來的60%,在95℃下反應(yīng)2h后其殘留活性是原來的40%。
②在熱變性時(shí)不會(huì)被鈍化,不必在每次擴(kuò)增反應(yīng)后再加新酶。
③大大提高了擴(kuò)增片段特異性和擴(kuò)增效率,增加了擴(kuò)增長度2.0Kb。由于提高了擴(kuò)增的特異性和效率,因而其靈敏性也大大提高。為與大腸桿菌多聚酶IKlenow片段區(qū)別,將此酶命名為TaqDNA多聚酶Taq DNAPolymerase。此酶的發(fā)現(xiàn)使PCR廣泛的被應(yīng)用。
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