一、技術簡介
外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200 nm,形態也呈現出多樣性,有研究分為9個類別依次為:單囊泡、雙囊泡、 多膜泡、小雙層膜泡、橢圓膜泡、小管、大管、不完整的膜泡、不規則膜泡,其中在不同類別的囊泡中可以發現三個附加特征:表面具涂層的膜泡、內含纖維的膜泡、電子致密囊泡。
本司采取通過透射電鏡確定外泌體大小。
二、實驗流程
1. 外泌體戊二醛固定。
2. 清洗:用1mL PBS清洗3次,每次靜置15min。
3. 鋨酸固定:加入0.5 mL 2%鋨酸溶液 4度固定2h。
4. 清洗:用1mL PBS清洗3次,每次靜置15 min。
5. 脫水:用50%、70%、80%、90%乙醇各1mL梯度脫水分別靜置15min,再用1mL 100%乙醇脫水2次,每次20min。
6. 置換:用1mL丙酮置換2次,每次靜置15min。
7. 浸漬。
8. 包埋:將樣品放入盛有純包埋劑的包埋板中。
9. 聚合:將包埋板置于65℃條件下聚合48h。
10. 染色:醋酸雙氧鈾染色 10min后清洗;醋酸鉛染色 10min后清洗。
11. 上機檢測。
12. 提供實驗報告。
三、服務說明及結果
1. 客戶提供:外泌體(30 μl)或由我司分離得到外泌體。
2. 公司提供:基本實驗步驟、圖片、數據分析結果。
3. 實驗周期:10個工作日。