葉民生物擁有一批優秀的文庫構建專業技術人員,具有豐富的建庫經驗和成熟的實驗方法,在cDNA合成、消化、連接及轉化等方面擁有成熟的技術,建成的文庫全長cDNA比例高,可用于大規模基因測序和目的基因的篩選。可以針對動物、植物、微生物等組織和細胞等材料進行文庫構建。本公司可提供全方位的cDNA文庫構建,包括:普通cDNA文庫、全長cDNA文庫、均一化cDNA文庫、差減cDNA文庫。
樣品要求
動物、植物、微生物組織 請提供足量的新鮮樣品(4℃保存,不超過一天)或將新鮮樣品立即存于液氮或-80℃后保存不超過一個星期。
注意: 用植物樣品建基因組文庫,為了降低文庫中的葉綠體污染,樣品須是植物的黃化苗嫩芽。若需建cDNA文庫,樣品必須是新鮮保存的。
RNA 如要提供RNA,要求總RNA>500ug,濃度>1ug/ul;mRNA>3ug,濃度>50ng/ul;OD260/OD280值:2.0,以我方電泳膠圖、紫外分析儀定量為準。 RNA 的總量根據庫容量不同會有所增加。
注意: a) 建議由我方提取RNA;b) 對于客戶提供的RNA,由于樣品原因建庫可能沒有結果或結果不好,其損失和責任全部由樣品提供方承擔;c)由樣品質量產生的任何問題,其損失和責任應全部由樣品提供方承擔。
純化后 DNA 請提供樣品濃度>10ng/ul ,最小量>20ug,OD 260 /OD 280值:1.80~2.00 ,請附上樣品的原電泳膠圖;定量以我方電泳膠圖、紫外分析儀定量為準。DNA 的總量根據庫容量不同會有所增加。若樣品未純化,我們將收取純化費用。
注意: 為了更好的保持RNA和DNA的狀態,防止樣品的降解,樣品在運輸時必須保持低溫狀態。
服務流程:
1) 業務洽談:具體服務內容、時限要求、付款方式等合同條款,需要事先商定,簽訂合同;
2) 寄送樣品:上海市范圍內我們可上門收取樣品,外地客戶需將樣品干冰保存,盡快送達我公司(可在洽談業務時商定);
3) 問題反饋:在實驗過程中發生的問題我們會及時向客戶反應,以便雙方共同解決,客戶也可隨時詢問;
4) 結果發送:項目完成后,我們會通知客戶并將各種結果以合適的方式發送,并請客戶確認;
5) 費用收取:客戶可以選擇支票或者銀行轉帳任何一種方式付費。
交貨內容: A. 產物電泳圖譜; B. 初始庫,保存在- 20 ℃ ; C. 文庫評價數據,包括庫容量,插入片段平均長度,重組效率 , cDNA 完整性評價等。
具體指標:
初始基因文庫庫容量 1 × 106pfu 以上,如需擴增,擴增后容量1×109pfu 以上;
插入片段平均長度 1.0~1.5kb( 非常規物種不承諾 ) ;
重組效率大于 90 %(質粒文庫) , 大于 70%( 噬菌體文庫 ) ;
cDNA 的完整性,讀框完整比例 ≥30% 【僅對長度為 3 kb 以下的基因而言】。