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目前用于非編碼RNA研究的主要方法有實時熒光定量PCR技術(shù)、熒光原位雜交、RNA 干擾和 RNA 結(jié)合蛋白免疫沉淀等,而熒光定量PCR方法作為檢測非編碼RNA表達(dá)的金標(biāo)準(zhǔn),其應(yīng)用更是廣泛。
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非編碼RNA目前主要研究包括長鏈非編碼RNA和微小RNA,長鏈非編碼
RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)通過多種機制發(fā)揮其生物學(xué)功能, 這些機制包括基因印記、染色質(zhì)重塑、細(xì)胞周期調(diào)控、剪接調(diào)控、mRNA 降解和翻譯調(diào)控等。lncRNA 通過這些作用機制在不同水平進(jìn)行基因表達(dá)調(diào)控;而微小RNA(microRNA,miRNA)是一種長度約21-23nt的非編碼RNA,成熟的miRNA主要作用是對基因轉(zhuǎn)錄后水平進(jìn)行負(fù)向調(diào)節(jié),通過引起其靶mRNA的降解或翻譯過程的中斷而參與細(xì)胞增殖、凋亡、免疫、神經(jīng)內(nèi)分泌以及干細(xì)胞分化等眾多生命過程。總之,它們不再被認(rèn)為是不能編碼蛋白質(zhì)的垃圾RNA,而研究非編碼RNA對了解基因調(diào)控、基因敲除、人類疾病防治及生物進(jìn)化探索等都具有重要意義。
microRNA檢測流程--高通量熒光定量PCR法
啟因生物利用熒光定量PCR的方法,建立了人/鼠microRNA檢測的數(shù)據(jù)庫,目前能提供500多種microRNA檢測;并且開發(fā)了microRNA檢測芯片,提供microRNA大規(guī)模篩選檢測技術(shù)服務(wù)。
附:microRNA qPCR芯片(腫瘤芯片,96孔板)
microRNA qPCR芯片(384孔板芯片)
詳細(xì)介紹: